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医学微生物学实验 第6次 肠道杆菌（2） 1. 肠道杆菌的进一步鉴定（生化反应结果与玻 片凝集（操作）） 2. 肥达反应（操作） 生化反应结果（双糖铁培养基）： 乳糖发酵 H2S 葡萄糖发酵 动力 伤寒杆菌 痢疾杆菌 大肠杆菌 生化反应结果（双糖铁培养基）： 乳糖发酵 H2S 葡萄糖发酵 动力 伤寒杆菌 - +/- ＋ ＋ 痢疾杆菌 - - + - 大肠杆菌 ＋ - ＋ ＋ 血清学鉴定 用志贺或沙门菌多价血清做玻片凝集 已知的抗体检测未知的抗原 Antiserum 1+Bac Antiserum 2+Bac. 血清学诊断：肥达试验 1.原理: -用已知伤寒杆菌的H、O抗原和甲、乙型副伤寒 杆菌H抗原，与病人血清作定量凝集试验，以测定患 者血清中有无相应抗体，根据抗体含量的多少及增长 情况，可辅助诊断伤寒及副伤寒。 已知抗原检测未知抗体 试管凝集试验 2. 方法：对倍稀释法 1 2 3 4 5 6 7 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 弃去 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 control 标记 加NS 加血清 加菌液 混匀 反应18－24h 倍比稀释 从第7管起 0.5ml 0.5ml 1:10血清 0.5ml 不加血清 3. 操作注意点 1). 倍比稀释 2). 吸头勿混, 注意吹打 3). 加菌液从第7管加起 4). 所有抗原完成后方摇匀 5). 观察结果勿振摇。 4. 结果观察 1. 观察勿振摇。 2. 从对照管观察起，后观察试验管。 3. 效价判定 ++++：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。 +++：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。 ++：液体稍透明，管底有部分凝集沉淀物。 +：液体较混浊，可见少量凝集物。 -：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点 （与对照管相似）。 － 效价：出现50％凝集（部分凝集:++)血清最高稀释度为效价。 抗体 1:40 1:80 1:160 1:320 效价 O ++++ +++ ++ + H ++++ +++ ++ ++ PA - - - - PB - - - - O效价 H效价 诊断意义 ? ? － － － ? ? － 结果解释 正常参考值: H 1:160 O、PA、PB 1:80 动态观察:在病程中逐周复查,若效价递增或恢复期效价比初次高4倍以上说明有诊断意义。 感染可能性大 感染可能性小 恢复期，或预防接种 早期感染，或交叉反应 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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