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拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测.pdf

第38卷第11期 湖南大学学报(自然科学版) V01.38,No.11 Hunan Nov.201 1 2 0l 1年l1月 Journalof University(NaturalSciences) 文章编号:1674-2974(2011)11-0086-04 拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测。 李秀山,刘 斌,赵李剑,唐东英,赵小英,刘选明+ (湖南大学生物学院,湖南长沙 410082) 摘要:在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26s蛋白酶体途径调节植物生长发育 和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了 pCold-Rad23融合蛋白重组表达栽体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋 ku左右的融合重组蛋白在大肠 白.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果表明,分子质量为94 杆茵中获得高效表达.采用纯化的重组蛋白多次免疫昆明小白鼠的方法,获得了特异性强并 且效价高的多克隆抗体,经蛋白印迹检测,在分子质量40ku左右处出现特异的蛋白质条 带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥Rad23蛋白特异性结合. 关键词:蛋白;泛素/26s蛋白酶体;原核表达;抗体 中图分类号:Q511 文献标识码:A 3 of Rad2Recombinant Purification Arabidopsis Proteinin Bacteria Engineering and ofIts PreparationPolyclonalAntibody LI Xiu-shan,LIUBin,ZHAOLi—jian,TANGDong—ying, ZHAO Xiao-ying,LIUXuan—ming+ of (College Sciences.HunanUniv-Changsha-Hunan410082,China) Biological which in in Abstract:Rad23gene participatesubiquitin/26Sproteasomepathway rolesin and tOhormone.Inorderto itsfunc’ knowntO study playimportantplantdevelopmentresponses transformedinto vector wasconstructedand tionandmolecularmechanism,an pCold-Rad23

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