总黄酮的含量测定法的研究概况.docVIP

精品论文 参考文献 总黄酮的含量测定法的研究概况 王继平 云 彪 乔 忠（内蒙古北方重工集团医院药剂科 014030） 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)11-0116-03 【摘要】 黄酮是一类生理活性显著、种类繁多的天然产物。大量研究表明，黄酮类化合物具有止咳去痰、增强心脏收缩等作用。本文对近几年中药总黄酮含量测定的常见方法进行了概述，为中草药黄酮含量的测定提供理论依据。 【关键词】 总黄酮 含量测定 黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，以唇形科、玄参科、爵床科、菊科等植物中最常见。黄酮类化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物，一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构，是天然酚类性化合物之首。该类化合物具有颜色，易与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，少部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮类化合物检测方法从单一的分光光度法、比色法发展到高效液相、毛细管电泳等技术的联用等。本文对近年来中药总黄酮含量测定的方法综述如下。 1 紫外可见分光光度法 1.1 紫外可见分光光度法 该法是利用某些物质的分子在200～800nm光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。一般以中草药、中药制剂自身所含的黄酮类化合物作为对照品，在紫外区或经显色后在可见光区，选择对照品的最大吸收波长处进行测定。陈思妮[1]等以芹菜素为对照品，在272nm处，2.144～10.72mu;g/ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系时测定广金钱草中总黄酮的含量。陈栋[2]等测定二冬膏复方中总黄酮的含量不低于0.003%，平均回收率为95.77%，RSD=1.61%，n=5。实验结果显示，以分子吸收光谱为基础的紫外-可见分光光度法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点，已在中药总黄酮含量分析中发挥着重要作用。 1.2 比色法 测定含量时，供试品中加入显色剂后再测定吸光度，这种紫外可见分光光度的方法又称为比色法。据文献报道，黄酮类化合物分子中若具有3-羟基、5-羟基或邻二酚羟基，则易于与金属盐类如铝盐、锆盐、锶盐、镁盐等反应，生成有色金属络合物，这些络合物作用在光谱上能产生明显的变化，吸收峰红移。常用于黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al(NO3)3、A1C13等。 在采用比色法进行测量时，要注意考察吸光度值的稳定性，在NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系中，碱性条件经常会影响结果的准确性和稳定性，只有物质中含有邻二酚羟基，并且邻二酚羟基的邻位没有取代时，Al(NO3)3比色法才在510nm左右有最大吸收。例如，测定肉苁蓉总黄酮含量时，以芦丁为对照品, 以亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠为显色剂，在510nm对其含量进行测定[3]。同法操作，程振芳[4]等研究表明，蓝盆花总黄酮提取量、提取次数具有一定的显著性。首次运用微波技术从淡竹叶中提取总黄酮，不仅反应速度加快，总黄酮的含量也明显提高[5]。 由于中药成分复杂，对总黄酮测定中产生各种干扰，故在实际测定中，均以显色测定法最为常见。 2 薄层扫描法(TLCS) 样品经薄层分离后直接测定，也可经适当处理后使之显色或产生荧光，在特定波长下用光度计测定其吸光度或荧光强度的方法称为薄层扫描法。于玲等[6]是用双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量，该法也适用于蒲公英总黄酮的测定[7]。结果表明，双波长薄层扫描法测定总黄酮含量时，操作简便 , 结果可靠, 重复性好。 薄层扫描法具有快速、简便、同时可测定多个样品的特点，因而在中药及其制剂的研究中具有广泛的应用，可进行中药的成分研究和含量测定也常用于中药鉴别。 3 高效液相色谱法(HPLC) 高效液相色谱法是在液相色谱的基础上引入气相色谱的理论和技术，并加以改进而发展起来的一种重要的分离分析方法。HPLC法是先使用水解法将黄酮苷水解为黄酮苷元后，再进行HPLC分析。该法在测定银杏缓释片和沙棘籽渣中总黄酮苷的含量时，具有分离效能高，分析速度快，灵敏度高等特点[8-9]。 紫外检测器(UV)是使用最普遍的检测器，具有灵敏度高(最小检出量可达10-7-10-12g)，不破坏样品，可用于梯度洗脱等特点。UV检测器中的光电二极管阵列检测器（DAD）最为常用。它不仅能显示3D-光谱-色谱，而且能很容易判断色谱成分的最大吸收波长，进行定性和定量分析。但紫外检测器有一个最大的不足，即只能检测有紫外吸收的样品。同样的问题存在于荧光检测器中，它比紫外检测器还