细胞周期作业--谷宁宁ppt.ppt

细胞周期各时相的主要特征 G2期检验点 检查DNA是否完成复制，细胞是否以生长到合适大小，环境因素是否利于细胞分裂等。组织带有DNA损伤的细胞进入M期，确保细胞基因组的完整性和稳定性。 细胞周期各时相的主要特征 M 期 M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要包括两种方式，即有丝分裂和减数分裂。遗传物质和细胞内其他物质分配给子细胞。 细胞周期各时相的主要特征 纺锤体检验点 监控着纺锤体微管与着丝点之间的连接并且促使有丝分裂中姐妹染色单体或减数分裂中同源染色体间张力的形成。 G1 phase:与DNA合成启动相关，开始合成细胞生 长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂 等，同时染色质去凝集。 S phase: DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构 G2 phase: 合成一定数量的蛋白质和RNA分子 M phase: 有丝分裂, 减数分裂和胞质分裂 两个子细胞 染色体浓缩 纺锤体 收缩环 小结 细胞周期各时相及主要事件 ◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法（PLM法） ◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) ◆缩时摄像技术，可以得到准确的细胞周期时间及分裂间期和分裂期的准确时间。 细胞周期长短测定 PLM法 标记有丝分裂百分率法(percentage labeled mitoses，PLM)：对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标记的TdR。 流式细胞仪法 三、细胞周期同步化 定义：指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期一致的现象。 细胞同步化 自然同步化 人工选择同步法 诱导同步法 1. 多核体：粘菌、疟原虫。 2 . 水生动物受精卵：海胆、两栖类。 3. 增殖抑制解除后的同步分裂：真菌休眠孢子。 （一）自然同步化 （二）人工同步化 1. 选择同步化 1）有丝分裂选择法 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 2）细胞沉降分离法 优点：可用于任何悬浮培养的细胞。 缺点：同步化程度较低。 CELL CYCLE 讲课人：谷宁宁 主要内容 诺贝尔奖获得者及其研究成果 细胞周期概述 细胞周期各时相及主要事件 细胞周期同步化 特殊的细胞周期 细胞增殖的意义 ◆细胞增殖(cell proliferation)是细胞生命活动的重要特征之一, 是生物繁育的基础。 ◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。 ◆多细胞生物由一个单细胞即受精卵分裂发育而来，细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。 ◆成体生物仍然需要细胞增殖，主要取代衰老死亡的细胞，维持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。 ◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细胞增殖。 所有生物体都由通过分裂而增殖的细胞构成。一个成年人大约拥有100万亿个细胞，而这些细胞都源于一个受精卵细胞。同时，成年人机体中大量的细胞还通过不断的分裂产生新细胞，以取代那些死亡细胞。细胞必须长大到一定的程度，复制染色体，并把染色体准确地分给两个子细胞，然后细胞才能分裂。这些不同的进程成为细胞周期。 荣获2001年诺贝尔生理学或医学奖的科学家做出了有关细胞周期的重要发现。他们识别出了所有真核生物中调节细胞周期的关键分子，真核生物包括酵母菌、植物、动物和人。 这些基础的发现对细胞生长的所有方面都具有巨大的影响。细胞周期控制的缺陷会导致肿瘤细胞中的某种染色体改变。这些发现能让我们在今后很长的时间内创造治疗癌症的新方法。 纳斯用遗传学和分子学方法，识别克隆并描绘了细胞周期的一个关键调节物质CDK。他发现CDK的功能在进化中被很好的保存了下来。CDK是通过对其他蛋白质的化学修饰来驱动细胞周期的。 亨特的贡献是发现了细胞周期蛋白（cyclin）——调节CDK功能的蛋白质。他发现细胞周期蛋白在每次细胞分裂中都周期性地降解，该机制被证明对控制细胞周期全程的重要性。 2001年的诺贝尔生理医学奖颁发给三位研究细胞周期（cell cycle)的生物学家：美国的利兰·哈特韦尔（Leland Haetwell)以及英国的蒂莫西·汉德（Timothy Hunt）与保罗·诺尔斯（Paul Nruse），以表扬它们发现细胞周期的调控因子的重大贡献。 Hartwell 1960s, Nurse 1970s 分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材料，利用温度敏感突变株，发现许多与细胞分裂有关的基因( cdc)。如： 裂殖酵母cdc2、