高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量.docVIP

高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量 高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量 更新日期：2009-12-21 点击： 宁晓闽　王宝奎　刘锡钧 　　提要　运用高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇的含量，具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。 　　关键词　雷公藤搽剂；　雷公藤内酯醇；　薄层扫描法；　含量测定 HPTLC Densitometric Determination of Triptolide (TL) in Triptolide Liniment Ning Xiaomin, Wang Baokui, Liu Xijun Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command of PLA, Fuzhou　350001 　　Abstract　HPTLC densitometric determination of Triptolide (TL) in Triptolide Liniment is simple, rapid, sensitive and reproductive. 　　Key words　Triptolide liniment;　Triptolide (TL);　HPTLC-Densitometric;　Determination. 　　雷公藤搽剂是由雷公藤醋酸乙酯提取物配制成的透皮制剂，用于抗炎、镇痛、免疫抑制等。雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇是主要的有效成分，但也是主要的有毒成分［1］。为了保证用药安全有效，探讨本品的内在质量，制定质控标准，本文采用高效薄层扫描法对雷公藤搽剂中的雷公藤内酯醇进行含量测定。 1　实验部分 1.1　仪器与试剂：CS-9000型薄层扫描仪(日本岛津公司)，高效硅胶G板(青岛海洋化工厂)，定量毛细管(美国产)；所用试剂均为分析纯；雷公藤内酯醇对照品(福建省医科所提供)，雷公藤醋酸乙酯提取物，雷公藤搽剂(均自制)。 1.2　薄层层析及扫描条件：高效硅胶G板为吸附剂，氯仿－乙醚(2∶1)为展开剂［2］，上行展开约9 cm，取出晾干测定，用岛津CS-9000型薄层扫描仪定位，雷公藤内酯醇 Rf值为0.74，扫描条件为 λS225 nm，反射锯齿扫描，摆幅12 mm， △Y 0.02，资料累积数为1，寻峰参数为2。 1.3　标准曲线的制备：精密称取减压干燥至恒重的雷公藤内酯醇对照品1.022 mg置10 ml容量瓶中，加无水乙醇溶解稀释至刻度，即得0.1022 μg/μl的对照品液。在高效硅胶G板上，用定量毛细管点样，1、2、7、10 μl的对照品液(0.1022 μg/μl)，以氯仿－乙醚(2∶1)室温上行展开9 cm，取出晾干按选定的扫描条件测定，结果见表1。以点样量为横坐标，斑点积分值为纵坐标，在0.1～1.0 μg范围内呈线性关系，求得回归方程 Y=0.0776+3.8928×10-4 X. γ=0.9999。 表1　雷公藤内酯醇扫描积分值 点样量(μl) 积分面积 1 2457 2 4754 5 12796 7 17738 10 25449 1.4　稳定性实验：取对照品溶液5 μl，按制备标准曲线的方法点样，层析，取出晾干后扫描，0.5、12、24、48 　h扫描，测定结果见表2。实验表明稳定性好。 表2　稳定性实验结果 测定项 0.5h 12h 24h 48h 积分面积 12831.574 12789.324 12789.283 13024.471 =12844.250； CV=0.97% 1.5　雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定：精密称取减压干燥恒重的雷公藤醋酸乙酯提取物5.005 mg置10 ml容量瓶中，无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为供试液。吸取供试液5 μl和对照品液2、5 μl点样，按选定的层析条件及扫描条件测定，外标2点法计算。结果见表3。 表3　雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定 点样量 (μl) 扫描面积 样品中内酯醇 测定量(μg/μl) 醋酸乙酯提取物中 内酯醇含量(%) 5 7310 0.0579　 0.1157　 5 7290 0.0580　 0.1159　 5 7427 0.0594　 0.1187　 =0.1168%； CV=1.44% 1.6　雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定：在供试液点样点上，加点雷公藤内酯醇对照品液(0.1022 μg/μl) 2 μl或5 μl，测定。结果见表4。 表4　雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定 样品中内酯醇含量(μg) 加入内酯 醇量(μg) 测定量 (μg) 回收量 (μg) 回收率 (%) 0.3127 0.2044 0.51