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新第一章蛋白质2节

一、蛋白质的一级结构 定义:指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序。 (二)肽 1.肽的表达方式(书写) ①肽链的主链骨架围绕一个中心轴螺旋上升,每3.6个氨基酸残基螺旋上升一周,此纵向距离即螺距为0.54nm(即每个氨基酸残基沿中心轴上升0.15nm,旋转100°) ②相邻螺圈之间形成链内氢键,肽链上每个AA残基的-C=O氧与其后第四个残基的-NH-氢之间形成链内氢键;氢键取向几乎与中心轴平行, ?-螺旋的稳定性主要靠此氢键维系。 ③?-螺旋有左、右螺旋两种,天然蛋白质分子多为右手螺旋。 ④氨基酸残基R侧链伸向外侧。 人的头发每年能生长20cm。请问α-螺旋的AA以怎么样的速度生长?(AA/秒) 0.2×109nm/0.15nm/365/24/60/60=42 肽链主链骨架180°的回折结构 特点: (四)无规则卷曲 泛指多肽链主链上不能归入明确的二级结构的区段。是一种非重复性结构。 根据多肽链条数分 维持蛋白质一级结构的作用力:肽键、二硫键 疏水作用( Hydrophobic Interactions) 是蛋白质分子中疏水性较强的一些氨基酸(如缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等)的侧链为避开极性溶剂水而被迫靠近 主要存在蛋白质的内部 五、蛋白质的性质 (一)蛋白质分子的大小 (二) 蛋白质的紫外吸收性质 原理:蛋白质因含在280nm有吸收的酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸,故亦在280nm有较强的吸收峰. 应用:可用于蛋白质的定量分析。 (三)蛋白质的两性解离及等电点 蛋白质与氨基酸一样,能够发生两性解离,也有等电点(pI) 。 特性:蛋白质处于等电点时(即pH=pI),溶解度最小,在电场中不移动。 (四)蛋白质的胶体性质 蛋白质分子大小属胶体质点范围(质点大小) 蛋白质分子表面有许多亲水基团,能与水分子起水化作用,形成水化层; 一定PH时,蛋白质的分子表面带相同电荷,分子与分子之间存在静电排斥力。 (五)蛋白质的沉淀反应 破坏蛋白质胶体形成的条件(破坏水化膜、中和电荷),可使蛋白质溶液变得不稳定而沉淀。 1.中性盐沉淀法(蛋白质未变性,为可逆沉淀) 盐析 常用的无机盐有:(NH4)2SO4 2.有机溶剂沉淀法 加入一定量的与水互溶的有机溶剂。(如酒精、丙酮、甲醇)(变性,不可逆,除非短时、低温操作) 原因:脱去水化膜 4 重金属盐沉淀法(变性,不可逆) 蛋白质带负电基团可与重金属离子(Cu+2、Hg+2 、Pb+2)结合成沉淀。临床上用于抢救误食重金属盐中毒的病人。 5 有机酸沉淀法(变性,不可逆) 生成不溶性的盐而沉淀。 6 加热沉淀法(变性,不可逆) (六)蛋白质的变性-重点 1.定义:当天然蛋白质受到理化因素剧烈影响后,其分子内部高度有序的高级结构解体,使蛋白质理化特性改变和生物活性丧失的现象。(原有的一级结构仍然保持不变的)。 (七)蛋白质的颜色反应 特定基团显示特征性颜色-用于蛋白质定性分析 知识点回顾 1.蛋白质的一级结构(定义) 2.活性肽-谷胱甘肽 3.二级结构-- ?-螺旋、?-折叠 4.三级结构与四级结构的区别 5.蛋白质的胶体性质、沉淀反应,变性作用 结构域有时也称功能域,功能域是指有功能的部分。功能域可以是一个结构域,也可以是两个或两个以上结构域组成。 3-磷酸甘油醛脱氢酶 三. 蛋白质的三级结构 (一)定义:是指多肽链在二级结构的基础上,再进行盘绕卷曲形成较致密的立体构象。【所有原子(主链+侧链)相互作用形成的空间构象。】 维系三级结构主要作用力:疏水作用力、氢键、范德华力、盐键 P25 从目前对球状蛋白质二、三级结构研究的资料来看,它们有一些共同的三级结构主要特征: ★球状蛋白质: 1、含多个二级结构单元 2、紧密的球状或椭球状实体 3、疏水基团在内;亲水基团在外 4、分子表面内陷形成凹穴 四.蛋白质的四级结构 定义:两条或两条以上的具独立三级结构的多肽链,通过次级键缔合在一起,缔合形成聚集体的形式构成蛋白质的四级结构。其主要研究亚基的数目、类型、及亚基之间的排布和作用力。 疏水键、氢键、盐键等 P27 亚基 如:肌红蛋白、Rnase、胰岛素等) 相同亚基(乳酸脱氢酶α4) 不同亚基(血红蛋白α2β2) 单体蛋白:仅含一条相对独立的多肽链。 寡聚蛋白: 含两条或多条相对独立的多肽链。 胰岛素 牛核糖核酸酶 血红蛋白 例:血红蛋白的四级结构的测定由佩鲁茨1958年完成,其结构要点为: 寡聚蛋白,含四个亚基两条α链,两条β链, α、β每个亚基由一条多肽链与一个血红素辅基组成。 4个亚基以正四面体的方式排列,彼此之间以非共价键相连(主要是离子键、氢键) 。 一般亚基不具有生物活性,只有当这些亚基聚合成一个完整的蛋白质分子后,才具有生物活性

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