39-红外分光光度法标准操作规程.doc

红外分光光度法标准操作规程 文件类型 质量检验仪器SOP文件 文件编码 SOP-QC-7039-00 执行日期 执行部门 质量部 起 草 人： 起草日期： 审 核 人： 审核日期： 批 准 人： 批准日期： 修 订 号 批准日期 执行日期 变更原因及目 ： 目 的：建立红外分光光度法标准操作规程。 适用范围：红外分光光度法测定。 责 任：质检员实施本操作规程，检验室主任负责监督本规程正确执行。 程　 序： 1.简述 1.1化合物受红外辐射照射后，使分子的振动和转动运动由较低能级向较高能级跃迁，从而导致对特定频率红外辐射的选择性吸收，形成特征性很强的红外吸收光谱，红外光谱又称振转光谱。 红外光谱是鉴别物质和分析物质化学结构的有效手段，已被广泛应用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部的相互作用。 习惯上，往往把红外区分3个区域，即近红外区（12800～4000cm-1，0.78～2.5μm），中红外区（4000～400cm-1，2.5～25μm）和远红外区（400～10cm-1，25～1000μm）。其中中红外区是药物分析中最常用的区域。红外吸收与物质浓度的关系在一定范围内服从于朗伯－比尔定律，因而它也是红外分光光度法定量的基础。 　　　红外分光光度计分为色散型和付里叶变换型两种。前者主要由光源、单色器（通常为光栅）、样品室、检测器、记录仪、控制和数据处理系统组成。以光栅为色散元件的红外分光光度计，波数为线性刻度，以棱镜为色散元件的仪器以波长为线性刻度，后者因缺点甚多，已淘汰不用。波数与波长的换算关系如下： 　　付里叶变换红外光谱仪（简称FT-IR）则由光学台（包括光源、干涉仪、样品室和检测器）、记录装置和数据处理系统组成，由于涉图变为红外光谱需经快速付里叶变换。 操作标准----质量管理 文件名称 红外分光光度法 标准操作规程 编 码 SOP-QC-7039-00 页 数 6-2 2.红外分光光度计的检定 所用仪器应根据中华人民共和国国家计量检定规程“JJG681-90色散型红外分光光度计”和中国药典附录规定，并参考仪器说明书，对仪器定期进行校正检定。目前国家尚未颁布付里叶变换红外光谱仪的计量检定规程，但这类仪器可参照色散型红外分光光度计进行检定。 2.1波数准确度 2.1.1波数准确度的允差范围检定规程规定，在4000～2000cm-1间允许误差为±8cm-1,2000cm-1以下，允许误差为±4cm-1。 2.1.2波数准确度检定方法 2.1.2.1以聚苯乙烯膜校正　按仪器使用说明书要求设置参数，以常用的扫描速度记录厚度为50μm聚苯乙烯膜红外光谱图。测量有关谱带的位置，其吸收光谱图应符合《药品红外光谱集》所附聚苯乙烯图谱的要求，并与参考波数（见表1）比较，计算波数准确度。 表1　聚苯乙烯吸收光谱常用的波数值 波数（cm-1） 波数（cm-1） 3027.1 1583.1 2850.7 1154.3 1944.0 1028.0 1801.6 906.7 1601.4 2.1.2.2以液体池用液体茚校正　液体茚在3900～690cm-1范围内有较多的吸收峰可资比较，适于测定中等分辨率的仪器。一般需用适当液层厚度的固定厚度密封液体池，选用液体池的窗片材料应能保证在测量波数范围内有良好的红外光透过率、窗片应有良好的光洁度和平面平行度，注样品时将液体池放在一楔形板上，打开2个进样孔塞，把样品用专用注射器从下部进样孔缓缓注入。同时观察池内液面缓缓上升而不夹带气泡，至液体在上进样孔内接近满溢时，取下注射器，先盖好下进样孔塞， 操作标准----质量管理 文件名称 红外分光光度法 标准操作规程 编 码 SOP-QC-7039-00 页 数 6-3 再盖上上进样孔塞，吸去外溢液体后即可在仪器上测定吸收光谱，其主要谱带见表2。 表2　茚主要吸收谱带的波数值（50μm液层，cm-1） 3970 3139.5 2770.3 1915.3 1553.2 1361.1 1251 1018.5 590.8 381.4 2.2波数重现性　用与2.1波数准确度测量相同的仪器参数，对同一张聚苯乙烯膜进行反覆重叠扫描。一般扫描3～5次。从扫描所得光谱测定波数的重现性。测得的各吸收峰的重现性应符合国家计量检定规程的要求。 2.3分辨率　以聚苯乙烯膜检定，用常规狭缝程序，通常的扫描速度，或以较狭缝程序用较慢的扫描速度，记录聚苯乙烯的图谱。在3110～2850cm-1范围内，应能显示7个吸收带，其中2924 cm-1和2851 cm-1两谱带的分辨深度应不少于18%透光