对虾白斑综合症病毒vp15基因的RNA干扰研究.pdfVIP

第31卷第1期 台 湾 海 峡 V01．31．No．1 OF0CEANOGRAPHYINTAIWANSTRAIT 2012年2月 JOURNAL Feb．，2012 张 衡，谷 力，杨 丰 (国家海洋局第三海洋研究所、生物遗传资源重点实验室，福建厦门361005) 蛋白，具有潜在的浓缩包装病毒基因组的功能．利用RNAi技术将vpl5基因沉默，来研究vpl5基因 h，每个 提取DNA模板用于荧光定量PCR分析．另外每组随机选取1只虾，取中肠，用于树脂包埋组织超 利用树脂包埋组织超薄切片电子显微镜技术观察发现vpl5基因被干扰后病毒粒子数量上明显降 外进一步阐明VPl5蛋白的功能及其在病毒组装方面的重要作用，对进一步了解病毒组装以及病 毒防治具有重要的意义． 关键词：海洋生物学；对虾白斑综合症；DNA结合蛋白；vpl5基因；RNA干扰 DOI：10．3969／J．ISSN．1000．8160．2012．01．007 中图分类号：1735 文献标识码：A 对虾白斑综合症自1993年爆发以来¨J，给虾养 随着WSSV基因组测序的完成，研究的方向转 殖业带来巨大的经济损失E2-6]．而造成这个病害的移到病毒编码蛋白的功能研究中，尤其是病毒的 罪魁祸首就是对虾白斑综合症病毒(WSSV)，该病 毒发病快、致死率高、传播迅速，目前已成为虾养殖 白¨…，它是一个强碱性蛋白，具有8个潜在的磷酸 业中危害最大的病毒．WSSV隶属于病毒科(Nima— 化位点，但均没有N．或O一连接的糖基化，理论等电 viridae)白斑病毒属(Whiwovirus)，为dsDNA病毒， (2002)¨纠等用EMSA、SouthWestern、dot 具有双层囊膜，不形成包涵体，形态为短杆状．对 spot等证 WSSV进行电镜观察，不同分离株不同地域的病毒 粒子及核衣壳在形态上差异不明显．该病毒是一种 无包涵体的杆状病毒，完整病毒粒子的横切面为圆 够自身发生相互作用。12I．这些结果表明该蛋白可能 形，纵切面为杆状略带椭圆，大小约(250～380)nm是一种与核酸相结合的多肽，具有潜在的浓缩和包 x(70～150)nm，直径约为90一100nm，一端有一 装病毒基因组的功能．此外，近来又有报道证明 细长的鞭毛状结构．目前GenBank上公布了3株VPl5能够通过直接浓缩DNA参与核酸的包装过 程‘13|． WSSV的基因组序列，分别为：(1)泰国株(WSSV— TH，AccessionNo．AF369029)1；(2)中国大陆株近年来，虽然对WSSV结构蛋白的功能研究有 (WSSV．CN，AccessionNo．AF332093)‘8。；(3)台湾 了重要进展，但对控制WSSV的传播至今尚无有效 株(WSSV—TW，AccessionNo．AF440570)E9]． 办法．与脊椎动物不同，对虾缺乏后天免疫系统其抵 收稿日期：2011-02—18 基金项目：国家农业部虾现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(nycVx46)；国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项资金 资助项目(2009044) 作者简介：张衡(1986～)，男，硕士研究生；E-mail：zhanghen9860207@gmail．con 台 湾 海 峡