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·实验研究·
干扰多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1
促进人胶质母细胞瘤U251细胞株侵袭性
的机制
毛峰杨洪宽邢细红谢蕊繁王宝峰郭东生雷霆
【摘要】 目的探讨干扰多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白l(LRIGl)基因表达促进人胶质母
细胞瘤U251细胞株侵袭性的机制。方法用携带U6启动子的LRIGI特异性短发夹RNA(shRNA)
negativeshBNA(neg)转染U251细胞株，通过G418筛选。鉴定得到稳定转染细胞株。采用侵袭实验
验证干扰LRIGl对U251侵袭性的影响，通过明胶酶谱实验检测基质金属蛋白激酶(MMP)-2、MMP-
9的活性。Westernblot法检测表皮生长因子(EGFR)及其下游丝裂原激活蛋白激酶／细胞外信号调
节激酶(MAPK／ERK)、磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B(P13K／AKT)信号通路蛋白的表达差异。结
mRNA降低至对照组(35．3％一
果含U6启动子LRIGlshRNA序列的质粒转染干扰组LRIGI
39，2％，P0．05)。干扰LRIGI表达组U251细胞侵袭数[(159士15)一(188±9)／视野]，较空白对
照组细胞侵袭数[(284-9)／视野]明显增多(P0．05)；干扰LRIGl激活EGFR通路传导；干扰
LRIGI后干扰组MMP-2较对照组活性增加(1．66±0．11—1．96土0．12，P0．01)，MMP-9干扰组较
对照组活性增加(4．82±0．27—4．47±O．29)。结论LRIGl表达下调后MMP-2、MMP-9活性增强，
从而促进U251细胞的侵袭性，可能通过激活EGFR信号通路引起。
【关键词】胶质瘤；基质金属蛋白酶；多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1；侵袭性
ofRNAinterference．mediatedleudHe．richand domains1
Mechanism repeatsimmunoglobulin-like
invasionof cellfineU251 MAO
sHencingpromoting glioblastoma Fmg，YANGHong—kuan．
gene
XING Rui-fan，WANGBao毋ng，GUO伪增一sheng，皿，Ting．DepartmentofNeurosurgery，
Xi一抽增，XIE
Scienceand
of Technology，Wuhan
ToniHospital，％，卿Medw击College，HnozhongUniversity 430030，
China
author：WANG
Corresponding Bao-feng。Ernail：wangbaofeng@yahoo．m
To themechanismofRNAinterference—mediatedleucine—rich№．
【Abstract】0bjective
explore
and domains invasionof cell
peats immunoglobulin—like glioblastoma
l(LRIGl)genesilencingpromoting
lineU25l-MethodsTheU6 transfect．
promoter．arivenplasm
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