农杆菌介导的甘薯遗传转化影响因素的研究.pdf

中国甘薯育种与产业化，2005，188—194 农杆菌介导的甘薯遗传转化影响因素的研究 李 强1’2 刘庆昌2 马代夫1 (1江苏徐州甘薯研究中心，徐州221121；2中国农业大学农学与生物技术学院，北京100094) 胞进行了遗传转化。结果表明，继代培养3d的胚性悬浮细胞最适合转化；菌液浓度0D。岫=0．1—0．9对遗传转化效率没 有明显影响；用0．45mol／L甘露醇预处理胚性悬浮细胞60rain可以显著提高转化效率；在共培养培养基中添加20 p,mol／L AgNO，和100AS均可以显著提高转化效率；共培养2—4d，转化效率高，并且转化愈伤组织状态好。利用适宜的转 i上rnol／L 化条件转化徐薯18胚性悬浮细胞，GUS瞬时表达率达90．2％。 关键词：甘薯，徐薯18，胚性悬浮细胞；根癌农杆菌介导 Factors AffectingAgrobacterium tumefaciens——mediated tionof sweetpotato(Ipomoeabatatas(L．)Lam．) Li Liu MaDaiful Qian91·2 Qingchan92 Xuzhou Research 22112 of and (1 SweetpotatoCenter，Xuzhou 1，Jiangsu；2CollegeAgronomyBioteehnology， China Agriculture University，Beijing100094) Abstract：The transformationconditionsof Agrobacteriumtumefaciens—mediated batatas(L．)Lain．， sweetpotato，咖omoea werestudied cell culturesof 1 Xushu maincultivarinChina．The byusingembryogenicsuspension 8，a A．tumefaciens strainEHAl01 a vector with harboringbinary pROA93 neomycinphosphotransferase gene(ⅣPrⅡ)andB—glueuronidase usedinthe resultsshowedthat cell cultures gene(GUS)waspresentstudy．The embryogenicsuspensionsubcuhuredfor 3 were forthetransformation．The days optimal A． concentrationfrom to hadno t“m电触iem OD600蛳=0．1OD600。m=0．9 on effectthetransformation，The for60rainwith significant pretreatment 0．45mol／Lmannitol