植物生物技术在柑橘遗传改良中的应用研究.pdfVIP

廖振砷等植物生物技术在柑橘遗传改良中的应用 39 植物生物技术在柑橘遗传改良中的应用 廖振坤1 张秋明2 (1．湖南省农业厅经济作物处长沙410005 2．湖南农业大学园艺园林学院 长沙410128) 柑橘种类具有复杂的遗传和生殖生理特性。大多数柑橘品种是高度杂合的(Soo。t和 Cameron，1975)。许多性状的遗传是由多基因控制的。通过杂交重组基因有计划地获得亲本 品种的基本性状或优良园艺性状的可能性很低。一些重要的基因型的花粉和胚珠完全不育或 部分不育，不能用作杂交组合的亲本。大多数种类具有无融合生殖的特性，容易从珠心细胞直 接发生不定胚，且具多胚，抑制了合子胚的发育。即使获得了杂交后代，实生苗童期长，大多数 种类在热带和亚热带条件下至少需要5年才能开花。柑橘的这些遗传特点和生理习性严重妨 碍了柑橘通过传统的育种方法进行遗传改良。尽管一些育种计划在100年前就已开始实施， 但进展不大，只有少数品种通过杂交方法而获得，大多数品种一直源于实生选种和芽变选种。 近30年来，随着植物生物技术的发展和应用，许多国家借助离体培养、细胞工程和基因工 程在柑橘遗传育种、品种改良方面取得了重大的突破，如通过体细胞杂交和体细胞胚发生培养 获得新的遗传基因型植株。通过胚乳培养已获得三倍体植株，通过花药培育获单倍体植株。 此外，还通过基因的导入获得转基因柑橘。为柑橘品种改良提供了新的资源，开拓了新的途 径。 1体细胞胚发生和培养 柑橘珠心细胞具有胚细胞的潜质。通常不需要生长激素类物质就可获得胚愈伤组织。但 的种子也获得了胚愈伤组织。 (甘油)刺激珠心组织胚胎的发生。Kunitake等(1991)研究对温州蜜柑只有乳糖有效。 cheiphila的基因，开展了FemmineUo柠檬和伏灵夏橙原生质体融合的研究。 年又报道分别采用宽皮柑橘和甜橙花粉培养形成了小植株。但对柑橘单倍体植株单倍体特性 尚不清楚。 从胚乳源的愈伤组织诱导体细胞胚，经培养可获得三倍体植株。Gmitter等(1990)从甜 园艺学文集 橙、柚、C．mnz!”m的胚乳(开花后12-14周切取)诱导形成了愈伤组织。只有甜橙发育了胚 植株。 Nito和|warnasa(1990)还从温州蜜柑的汁囊产生了胚性愈伤组织。 2原生质体培养 源的珠心愈伤组织通常是原生质体再生胚和植株最合适的源。 种原生质体培育获得的柑橘树已经结果。与原生质体来源的品种果实极为相似。 将源于珠心组织悬浮培养的甜橙原生质体与柚叶肉原生质体融合，获得了与葡萄柚相似 的植株。同样，Ohgawara等(1991)从甜橙叶肉原生质体与珠心细胞悬浮的原生质体融合获得 胚珠原生质体培养再生了植株。 3体细胞杂交 从原生质体成功获得植物为体细胞杂交奠定了基础。首例成功的柑橘体细胞杂交是一个 aurantifolia)和伏灵夏橙原生质 生质体融合而获得的。Gro．≈ser等(1989)从Key柠檬(Citrus 学、细胞学、同功酶和DNA限制模型进行了鉴定。 原生质体融合可能证明是跨越有性杂交障碍一个重要的途径。这由哈姆林甜橙原生质体 disticha上胚轴源愈伤组织原生质体融合得到了证实(Gmsser (源予胚悬浮培养)，与Severinia 等，1988)。电有部分获得的属间杂种从试管移出后不能继续生长发育，无法存活。表明体细 胞杂交也存在遗传和生理上不亲和的限制，柑橘体细胞杂交步骤以脐橙和默科特橘杂交为例。 分别从Ni∞tiana和Petunia花芽成功分离单倍体配子原生质体，而获得三倍体。 Kobayashi等(1988)通过体细胞杂交产生的四倍体杂种其性状与母本相比，有所放大。 体细胞杂交为新的重组基因型柑橘接穗和砧木品种育种创造了条件。下表列举了从有性 亲和、不亲和亲本获得的属间体细胞杂种。 廖振坤等植物生物技术在柑橘遗传改良中的应用 从花中切取月E珠 进行培养 从胚珠诱导的殊心愈伤组织 I 胤鑫一撬 …一。跨鬟： E三三虱