植物美白提取物的筛选及作用机理探索研究.pdfVIP

天津商业大学 硕士研究生毕业(学位)论文 姓 名：王鹏 年 级：发酵工程071 专 业：发酵工程 研究方向：生物活性物质筛选 论文题目：植物美白提取物的筛选及作用机理探索 导 师：王素英教授 完成日期：2010年4月9日 天津商业大学 植物美白提取物的筛选及作用机理探索 Studiesonthe andtheAction Screening MechanismofWhit Plant ing Extracts 专 业： 筮醛王程一 研究生： 王鹏 生物技术与食品科学学院 2010年4月 中文摘要 皮肤色素沉着是由各种内、外因素引起的以面部色素形成过多为表现的病理 性变化，临床上常见于黄褐斑、雀斑和黑斑病等多种疾病。由于多方面因素的限 制，目前尚缺乏完全有效的美白剂治疗，但经国内外众多学者的研究，结果表明 植物提取物对于色素沉着性疾病具有一定的疗效。我们基于这个事实，从细胞分 子生物学角度，研究不同种植物提取物在皮肤美白功能方面的作用机理。 首先，以20种常见的植物提取物为对象，研究其酪氨酸酶抑制作用和抗氧 化作用，筛选不仅具有强酪氨酸酶抑制活性，而且具有抗氧化性的植物提取物。 结果表明，20种样品均表现出不同程度的酪氨酸酶抑制作用和抗氧化能力。其 中，绿茶、葡萄籽、巴西大樱桃具有显著的酪氨酸酶抑制活性和强抗氧化能力。 其次，以B16小鼠黑素瘤细胞为受试细胞，探讨葡萄籽、绿茶、巴西大樱 桃3种样品对细胞的增殖、酪氨酸酶的活性及黑色素合成的抑制作用。结果表明， 葡萄籽、绿茶、巴西大樱桃3种样品对细胞内酪氨酸酶活性和黑色素的合成具有 显著的抑制作用，而且无毒副作用。我们还证明了葡萄籽提取物对黑素瘤细胞内 ’ 酪氨酸酶的蛋白表达有下调作用。 在上述研究的基础上，以MRC．5人胚肺成纤维细胞为受试细胞，考察绿茶、 葡萄籽、巴西大樱桃3种样品对H202氧化损伤细胞模型的抗氧化保护作用。结 果表明，上述3种植物提取物能有效地减轻H202对MRC．5细胞的损伤，并对细 胞内的ROS活性氧具有一定的清除作用。 最后，对绿茶、葡萄籽、巴西大樱桃3种植物提取物进行了HPLC纯化及 LC—MS的成分分析，发现三种植物提取物中可能的有效成分是维生素C或原花 青素类物质。此外，将植物提取物制成美白化妆品成品，并对美白功效进行了验 证试验，为化妆品美白原料的选择提供参考。 通过上述实验，证实了绿茶、葡萄籽、巴西大樱桃3种植物提取物具有抑制 黑素瘤细胞黑色素合成的作用，其作用机理可能在于：①可以直接抑制黑素瘤细 胞内的酪氨酸酶的蛋白表达。②对酪氨酸酶活性的抑制和强抗氧化能力也对阻断 黑色素合成具有重要作用。另外本实验还证实，无细胞系统蘑菇酪氨酸酶抑制试 验适于美白植物提取物的筛选，而黑素瘤细胞黑色素合成的抑制实验能更准确地 判定美白植物提取物的功效和机理。 关键词：植物提取物；酪氨酸酶；抗氧化性；B16黑素瘤细胞；MRC．5人胚肺 成纤维细胞；功效评价 Abstract isakindof variantcausedvariousinternal Hyperpigmentationpathological by andexternalfactorsandcharacterizedbrown suchdiseasesas