植物细胞工程技术在枣育种中的应用研究.pdfVIP

164 干果研究进展(5) 植物细胞工程技术在枣育种中的应用 白瑞霞张媛彭建营’ (河北农业大学园艺学院，保定071001) 摘要：简要介绍了植物细胞工程技术各主要分支学科在枣育种研究中的应用，包括快速繁殖技 术、胚培养、离体受精、单倍体育种、原生质体培养及融合、体细胞胚胎发生和人工种子、体细 胞无性系变异、超低温种质保存等，并对其发展前景进行了讨论。 关键词：植物细胞工程技术；枣；育种 植物的细胞具有在发育上的全能性，即在适宜的条件下，一个植物细胞可形成一个完整 的植株。植物细胞工程技术就是以植物细胞的全能性和体细胞有丝分裂的均等性为理论依 据，以植物细胞为单位，按照人们的预先设计，有目的、有计划地对植物细胞进行加工、改 造，使其遗传和生物学特性发生改变，从而对植物体进行创造设计的技术。通过植物细胞工 程可以改良和创造新的生物种质。自20世纪50年代以来，植物细胞工程研究取得了很多成 果，许多研究成果已应用于育种实践。植物细胞工程包括植物脱毒快速繁殖、胚培养、原生 质体培养和融合、人工种子和体细胞无性系变异等多方面内容。 Mill．)植物，原产我 枣(ZiziphusjujubaMill．)为鼠李科(Rhamnaceae)枣属(Ziziphus 国，栽培历史悠久，分布广泛，具有重要的经济价值，正在成为我国果树生产新的发展热点。 近年来，植物细胞工程技术在枣育种研究中得到广泛应用，显示出巨大的潜力。 1植物细胞工程技术在枣育种中的应用 1．1快速繁殖技术 利用组织培养对优良品种进行大量的快速无性繁殖，实现工厂化生产，可大大提高繁殖 系数，并能最大限度的保持品种的遗传稳定性，对加速良种推广具有重要价值。利用各种营 养器官培养是目前获得枣再生植株并建立离体再生体系最简便且有效的途径。目前，已能从 枣的茎尖、茎段、芽、叶片、胚轴、子叶等各种外植体诱导成植株。在枣快繁中一般选用幼 嫩的枣头，也可选用休眠枝或利用根蘖条。通常不经愈伤组织阶段而直接将其培育成苗。不 同枣树品种所需的培养基类型、激素配比，以及启动、分化和生根的难易程度，均有较大差 异。迄今已建立了金丝小枣【l】、鸡蛋枣【2】、赞皇大掣31、无核枣【4】、梨枣【5】、灰枣【6】等近20个 品种的快繁体系。 茎尖培养可以有效的脱除病毒，获得脱毒苗。枣疯病是枣树易感染的一种毁灭性病害， 茎尖培养已经在脱除枣疯病病原中得到成功应用。朱文勇等【7J采用直接培养O．1棚．3mm的茎 尖和二次茎尖分生组织培养相结合的办法，取得了较好的脱毒效果。田砚亭等【8】采用热处理 ‘通讯作者E—mail：pjy@hebau．edu．cn。 植物细胞工程技术在枣育种中的应用 165 1．2胚培养 胚培养是对种胚进行人工离体培养的技术，该技术是育种研究中克服胚败育或发育不 良，提高萌发率以及提早萌发的有效手段。根据外植体的不同可以分为胚、胚珠、子房培养 3种。枣中普遍存在着胚发育不良或中途败育而不能获得种子或种子难以萌发，严重影响枣 常规杂交育种的正常进行。应用胚培养技术，可以克服这一困难。胚培养的成功与否，与胚 的发育时期和基因型、培养基的成分和胚的剥离方法有密切关系。段乃彬等【9】对影响枣树胚 离体培养的3个因素：取材时期、激素配方及光照条件进行了研究。王玖瑞等【10】以早脆王为 试材，对枣幼胚培养中褐化的原因及克服措施进行了研究，结果表明，剥去珠被接种可以有 效防止褐化，加倍的MS培养基可以促进其幼胚褐化，附加活性炭可以减轻早脆王完整胚珠褐 化。祁业凤等【1l】以冬枣、金丝丰等为试材，对坐果后10一70d幼胚进行培养，结果表明，枣 离体胚接种后主要有3种生长方式，即形成愈伤组织、子叶间小叶增生和胚直接萌发成苗。 杜学梅等【12】建立了枣胚培养的再生体系，结果表明，适宜胚挽救的最小胚龄为花后50d左右； 花后70～72d胚龄的胚适宜培养基为1／2MS+IBA O．4mg／L+BA0．8mg／L+LH 5mg／L+5％蔗糖，胚培苗经扩繁后转入1／2MS+IBA1．0mg／L+