酶工程章节重点(含答案).ppt

１酶的生产方法，微生物产酶的优点 答：1、提取分离法（Extraction）、生物合成(Biosynthesis)、化学合成(chemicalsynthesis)。 2、(1)微生物生长繁殖快，生活周期短。因此，用微生物来生产酶产品，生产能力（发酵）几乎可以不受限制地扩大，能够满足迅速扩张的市场需求。 (2)微生物种类繁多，它们散布于整个地球的各个角落，而且在不同的环境下生存的微生物都有其完全不同的代谢方式，能分解利用不同的底物。 (3)这一特征就为微生物酶品种的多样性提供了物质基础。 (4)特别是当基因工程介入时，动植物细胞中存在的酶，几乎都能够利用微生物细胞获得。 因此，有计划和仔细地筛选微生物菌种，通常可以获得能够生产几乎任何一种酶的适当细胞。;２酶生物合成的调节方式答：◇转录水平的调节、◇转录产物的加工调节、◇翻译水平的调节、◇翻译产物的加工调节和酶降解的调节等。 ３什么是组成型酶和调节型酶？ 组成型酶（Constitutive enzyme）：生物细胞中合成的酶的量比较恒定，环境对这些酶的合成速率影响不大。如DNA聚合酶、RNA聚合酶、糖酵解途径的各种酶等。 适应型酶（Adaptive enzyme）或调节型酶（Regulated enzyme）：生物细胞中合成的酶的含量变化很大，其合成速率明显受到环境因素的影响。如大肠杆菌β-半乳糖苷酶。 生物体为了适应环境的变化，使代谢过程有条不紊地进行，需要根据各种条件的变化，对各种适应型酶的生物合成进行调节控制。;４产酶微生物具备的基本条件，常见微生物举例。 答：（1）酶的产量高；发酵周期短,（2）产酶稳定性好； （3）容易培养和管理；不易变异退化 （4）利于酶的分离纯化；最好是产生胞外酶的菌种 （5）安全可靠、无毒性等。对医药和食品用酶,不是致病菌 细菌（大肠杆菌：天门冬氨酸酶,限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、枯草芽孢杆菌α-淀粉酶, 蛋白酶, β-葡聚糖酶，5’-核苷酸酶，碱性磷酸酶等。） 放线菌（主要是链霉菌，生产葡萄糖异构酶的主要微生物。还可以用于生产纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、几丁质酶等。此外，链霉菌还含有丰富的16α羟化酶，可用于甾体转化） 霉菌（霉菌是一类丝状真菌,黑曲霉(糖化酶，α-淀粉酶)、米曲霉(果胶酶、核酸酶P)、红曲霉、青霉、木霉、根霉、毛霉等。）、 酵母（啤酒酵母(转化酶、丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶)、假丝酵母可以用于生产脂肪酶、尿酸酶、尿囊酶等可以用于甾体转化） 。;５酶发酵的生产方式，产酶的一般工艺流程及控制参数． 答：酶的发酵工艺条件与控制：1、培养基；2、发酵条件及控制； 3、提高产酶的措施;６提高酶产量的措施 答：添加诱导物、控制阻遏物浓度、添加表面活性剂等 （1）对于诱导酶的发酵生产，在发酵过程中的某个适宜的时机，添加适宜的诱导物，可以显著提高酶的产量。诱导物一般分为三类：酶的作用底物、酶的催化反应产物、作用底物的类似物。例如，乳糖诱导β-半乳糖苷酶，纤维二糖诱导纤维素酶，蔗糖甘油单棕榈酸诱导蔗糖酶的生物合成等。 （2）阻遏作用根据其作用机理的不同，可以分为产物阻遏和分解代谢物阻遏两种。◇为了减少或者解除分解代谢物阻遏作用: 控制培养基中葡萄糖等容易利用的碳源的浓度。采用补料、分次流加碳源，控制碳源的浓度在较低的水平，以利于酶产量的提高。 添加一定量的环腺苷酸（cAMP），可以解除或减少分解代谢物阻遏作用，若同时有诱导物存在，即可以迅速产酶。 ◇对于受代谢途径末端产物阻遏的酶，可以通过控制末端产物的浓度的方法使阻遏解除;添加产酶促进剂 可以促进产酶、但是作用机理未阐明清楚的物质。 例如，添加一定量的植酸钙镁，可使霉菌蛋白酶或者桔青霉磷酸二酯酶的产量提高1～20倍；添加聚乙烯醇（Polyvinyl alcohol）可以提高糖化酶的产量。 产酶促进剂对不同细胞、不同酶的作用效果各不相同，现在还没有规律可循，要通过试验确定所添加的产酶促进剂的种类和浓度。 ;７酶生物合成的模式？影响合成模式的因素，理想的酶合成模式是什么？;8 monod 方程表达式和意义;９固定化细胞和固定化原生质体产酶;１０固定化细胞产酶动力学方程式;11、酶活力和比活力;1 酶提取、分离纯化基本技术路线;2 酶粗提常用的方法？酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质，选择适当的溶剂;3 常用的酶蛋白分离纯化方法有哪些？;4 酶蛋白盐析沉淀和有机溶剂沉淀原理？;5 膜过滤分离的分类和截留物质的种类？膜过滤：采用各种高分子膜为过滤介质 ;6 层析分离的分类和分类依据？层析技术，亦称色谱技术，是一种物理的分离方法;7 离子交换和凝胶层析分离蛋白质的原理？;第五章酶的非水相催