应用siRNA表达框架进行原代细胞RNA干扰的操作方法.pdfVIP

第3l卷第4期 大连医科大学学报 VoI．31No．4 2009年8月 JournalofDalianMedical Aug．2009 University 应用siRNA表达框架进行原代细胞 RNA干扰的操作方法 孙 杰1，张鹏2，姜妙娜1，郭连英1 (1．大连医科大学病理生理学教研室，辽宁大连i16044；2．大连医科大学中山学院计算机教学中心，辽宁大连116023) 因转录后沉默的过程，它已经广泛应用到基因功能研究、基因表达调控机制和抗病毒感染等热门领域，在哺乳动物 的原代细胞中进行RNA干扰的研究为功能基因研究提供了重要意义。siRNA表达框架与脂质体的转染率直接影 响RNA干扰的效果，本文介绍了如何设计和构建siRNA表达框架，筛选最佳的靶位点。 关键词：RNA干扰；siRNA表达框架；原代细胞 中图分类号：Q31 文献标志码：B 文章编号：167l一7295(2009)04—0351一04 MethodsofinitiationRNAinterference稍thsiRNA expression cassettesin cells primary SUN Jiel，ZHANG Miao—nal，GUOLian—yin91 Pen92，JIANG Medical 1 Learn— Univenity，Dalian16044，China；2．Computer (1．DepartmentofPathophysiology，Dalian Center 11 ing ofZhongshanCollege，DalianMedical【，厅娩邝毋，Dalian6023，China) in Abstract：Tointroducethe of RNAinterferencemediatedsiRNA cassettes cell． processinitiating by expression primary form RNA a of mediateddouble—stranded interference(RNAi)ishighlyspecific posttranscfiptionalgenesilencing by the andhasthe be RNA．RNAihas becomeoneof most functional tools to used rapidly powerful genomicsrecently potential in RNAin cultured cellsis ofSUCCESS a