芸薹属查尔酮合酶基因家族RNA干扰载体的构建.pdfVIP

芸薹属查尔酮合酶基因家族RNA干扰载体的构建.pdf

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贵州农业科学2010,38(9):1~4 Guizhou Sciences Agricultural 芸薹属查尔酮合酶基因家族RNA干扰载体的构建 闫楠,刘琼,马丽娟,柴友荣’ (西南大学农学与生物科技学院,农业部生物技术与作物品质改良蘑点实验室,重庆市作物品质改良重点实验 室,重庆市油菜工程技术研究中心,重庆北碚400716) [摘 M的启动子与间隔区、间隔区与终止子 酶切方案将其反义片段、正义片段分别亚克隆到平台载体pFGC5941 之间,形成RNAi载体,转化大肠杆菌,完成复合PCR鉴定,然后转化根癌农杆菌。结果表明:经测序,以甘 蓝型油菜BnCH5l基因为模板克隆的芸薹属CHS基因家族的RNAi片段BCHSI为831bp,采用NCO+ 814 bp的 薹属CHS基因家族RNAi载体的成功构建,将促进甘蓝型油菜、白菜、甘蓝等芸薹属物种类黄酮性状的研 究与修饰。 [关键词]芸薹属;类黄酮;查尔酮合酶(CHS);RNA干扰(RNAi);载体构建 [中图分类号]$565.9 [文献标识码]A ConstructionofRNAInterference VectorofChalcone Gene inBrassica SynthaseFamiIY YAN Nan,LIU Qiong,MALi-juan,CHAlYou—rong。 Center (ChongqingforRapeseedEngineeringTechnology,ChongqingKeyLaboratoryofCropQualityImprovement, KeyLaboratoryofBiotechnology&Crop and QualityImprovement.MinistryofAgriculture.CollegeofAgronomy BlofPcJlnofDgy,SouthwestUniversity,Beibei,Chongqing400716,China) RNA Abstract:The ofChalcone in 831一bp interference(RNAi)fragmentsynthase(CHS)genefamily Brassicawas PCRand cloned thentheantisenseandsense wereinsertedintothe by fragments promoter— and ofRNAibasicvector M Ncol+AatlIandBamHJ-+_XbaI spacerspacer—terminator pFGC5941using double PCRidentificationshowedthatthe11814_bDRNAivector digestionsrespectively.Thecompound was l LBA4404 turne strainw

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