应用纤维蛋白胶治疗动脉瘤的实验研究.pdf

塑! 堑兰童苎耋三些量丝!垒三丝耋竺星窭重堡 应用纤维蛋白胶治疗动脉瘤的实验研究 侯 宜 许侃 王冰梅 王海东 罗 祺 (吉林大学再生医学科学研究所长春 130021) 摘要：目的：通过家兔颈动脉血管造影来观察成纤维细胞一纤维蛋白胶栓塞动脉瘤的效果。方法： 采用组织工程技术在体外建立成纤维细胞库，井将成纤维细胞在人纤维蛋白胶中三维培养，直视下用成 纤维细胞能够在纤维蛋白胶中蔑好生长。(2)成纤维细胞·纤维蛋白胶组栓塞效果明显优于纤维蛋白胶组。结 论：成纤维细胞．纤维蛋白胶可以栓塞动脉瘤。 关键词：纤维蛋白胶动脉瘤 颅内动脉瘤是致残率及死亡率很高的疾病。颅内动脉瘤的治疗原则是完全闭塞动脉瘤，将动脉瘤腔 排除于血液循环之外。目前临床治疗方法有：(1)手术夹闭治疗；(2)经血管内介入治疗。由于血管内治疗 具有微侵袭性、副损伤小等诸多优势，已经得到广泛的认可。本实验根据组织工程原理，采用体外培养的 成纤维细胞与纤维蛋白胶的复合物作为栓塞材料，为动脉瘤血管内治疗提供了新的思路。 1 材料与方法 1．1 成纤维细胞的三维培养 采用酶消化法从新生兔皮肤中获得成纤维细胞，通过体外培养、传代、冻存、复苏技术在体外建立成 细胞悬液。将上述细胞悬液与人纤维蛋白原(上海菜±血制品公司)lOmg等体积混合，并轻微搅拌。加入 物，将其置于37℃恒温箱l一3rain后完全凝固，呈透明状无色的半固态凝胶，可被手术镊垂直提起，且保 箱中培养。隔日更换培养液一次，定期在倒置显微镜下观察细胞与纤维蛋白胶的吸附、生长、增殖情况。 1．2动物模型与分组 一岁新西兰种兔(吉林大学动物部)，体重2．4—3．2kg，雌雄不限，按标准实验动物方法饲养。氯胺酮 腹腔麻醉后，将兔仰卧于手术台上，头与四肢固定。头部轻度过伸，中线切开，暴露右侧颈总动脉，向上一 直分离至颈内颈外动脉分叉处，于距离分叉0．5～1．Ocm处夹闭(缝扎)颈外动脉。其动脉盲端可视为简易 动脉瘤模型。通过调节对动脉瘤底的缝扎部位来调节动脉瘤大小，动脉瘤底到开口距离为3．2～5．8ram。 为防止痉挛，手术野用尼莫地平液冲洗。直视下由动脉瘤远端用微量注射器注入细胞．纤维蛋白原混合 液，然后注入凝血酶，同时夹闭动脉不超过三分钟，暂时阻断血流，防止栓塞物凝固前被血流冲跑，所有血 管内操作均于动脉瘤制作成功后立即进行，使之达到完全闭塞，无残颈、残腔。选用的36只新西兰白兔随 机分为3组：实验组动脉瘤16倒用成纤维细胞一纤维蛋白胶复合物进行栓塞。对照组动脉瘤16例单纯用 纤维蛋白胶进行栓塞；空白组4例用来检测动脉瘤腔有无自发血栓形成。 吉林省第三届科学技术学术年会 889 1．3影像学检测 分别于栓塞术后2周、4周经颈总动脉对动物行血管数字剪影(DSA)检查，对动脉瘤栓塞程度进行评 估。评估标准分为完全闭塞，复发瘤颈及动脉瘤完全再通。造影剂采用稀释后的泛影葡胺。 2 结果 倒置显微镜观察，新制成的成纤维细胞一纤维蛋白胶复合物为透明状胶冻样，悬浮于培养液中，细胞 呈梭形，均匀的分布于胶样物中，2天后可见成纤维细胞出现分裂相，4天后复合物透光度降低，2周时复 合物周边细胞成分少的部位可见降解碎片，4周时复合物透光度明显下降，强度类似于肌肉组织。 动脉瘤栓塞2周时血管造影显示：纤维蛋白胶组有4例复发瘤颈，3例完全再通，成纤维细胞一纤维 蛋白胶复合物组有6例完全闭塞，1例复发瘤颈，没有完全再通发生。动脉瘤栓塞4周时血管造影显示：纤 维蛋白胶组有6例完全再通，1例复发瘤颈。成纤维细胞一纤维蛋白胶复合物组5例完全闭塞，2例复发 瘤颈，没有完全再通发生。所有空白组(4例)的动脉瘤瘤腔持续存在，载瘤动脉在整个一个月的实验中保 持畅通。 3 讨论 detachable 目前血管内治疗颅内动脉瘸的主要方法是利用可解脱白金弹簧圈(Guglielmicoil，GDC)栓 塞动脉瘤腔，通过GDC以及GDC周围形成的血栓达到闭塞动脉瘤的目的。不幸的是由于血栓往往不能机 化导致动脉瘤的复发长期困扰着临床工作者，GDC等栓塞材料的长期有效性一直受到怀疑。有人强调动 脉瘤最终的治愈是靠含有细胞及胶原的活体组组填塞，而不能是单纯血栓的填充…。目前学者们的研究焦