里氏木霉纤维降解酶系的分泌蛋白质组研究.pdfVIP

里氏木霉纤维降解酶系的分泌蛋白质组研究.pdf

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ofextracellular in Proteomic cellulolyticenzyme analysis reesei Trichoderma to DissertationSubmitted of Technology ingUniversity Nanj in fulfillmentof partial requirement forthe of degree of Master Engineering By LIU Changqing XU Supervisors:Prof.Lin Associated YAN Prof.Ming 2008 May J■■】lJr■ J,■●■■ ——————————幽L—jIYIlllfIl2rlll rtloIIllfl8II[Ir4II[t[2If114lrlll攀 摘要 随着石化燃料由短缺变枯竭以及环境问题的凸显,可持续发展问题越来越受到人们的 重视。可再生资源木质纤维素的高效利用技术,已成为本世纪最具前景的可持续发展能源技 术之一。而纤维原料的酶处理方法成为了热点。本文通过生物信息学,双向电泳技术等手段 对里氏木霉的纤维降解体系进行了较系统的研究,旨在掌握影响里氏木霉纤维降解体系性能 的关键因素,为今后的工业应用提供理论依据。 从全基因组角度利用生物信息学手段系统分析了里氏木霉潜在的纤维降解功能蛋白质 组,并运用相关软件进行了分泌蛋白组的预测。里氏木霉分泌蛋白组共有分泌蛋白294条。 里氏木霉蛋白体系中和纤维降解相关蛋白38条,其中有27个纤维降解酶为胞外蛋白,包括 了所有已见报道的里氏木霉胞外纤维降解酶,并有5条未见报道。对里氏木霉的分泌蛋白组 图谱进行了双向电泳模拟分析。 用双向电泳考察里氏木霉分别在4种碳源条件下分泌组中纤维降解酶的分布情况。结果 表明:在甘油或葡萄糖为碳源时仅CBHII,Axel和BxL有微量表达。在纤维二糖为碳源时检 量表达,表达量总和占总分泌组的61%。纤维素诱导的纤维降解酶组分情况和纤维二糖条件 相似,但表达量和酶活性都有显著上升。在甘油或葡萄糖为碳源时图谱辨识的三种酶是里氏 木霉组成型表达的纤维降解酶。 为了进一步考察里氏木

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