盾叶薯蓣细胞悬浮系的建立研究.pdfVIP

J051 盾叶薯蓣细胞悬浮系的建立 吴红利，袁丽红，杨红燕 (南京工业大学制药与生命科学学院，江苏 南京 210009) 摘 要 本实验挑选培养在 NAA,BA不同浓度配比下 MS固体培养基上的盾叶薯蓣 （Dioscorea zingiberensis C.H. Wright）愈伤组织为实验材料，结果发现接种在附加0.2mg/L NAA,2.0 mg/L BA的MS固体培养基上的盾叶薯蓣愈伤组织，形成了颜色嫩白、质地松软的泥状愈伤组织，适合 用于建立盾叶薯蓣细胞悬浮系。以培养在此MS固体培养基上的愈伤组织为研究对象，探讨了不 同激素及其浓度和不同初始pH值对盾叶薯蓣悬浮培养系建立的影响。结果表明适合盾叶薯蓣细 胞悬浮培养的条件为：以MS培养基为基本培养基，附加2.0mg/L NAA,0.2 mg/L BA，pH值5.5～ 6.0，建立了形态规则、一致、增殖迅速、分散度良好的盾叶薯蓣悬浮系。为发酵培养盾叶薯蓣 细胞和研究次生代谢产物提供理论依据和基础。 关键词 盾叶薯蓣， 细胞悬浮培养， 碳源， pH值， 激素 ESTABLISHMENT OF DIOSCOREA ZINGIBERENSIS C.H. WRIGHT CELL SUSPENSION CULTURES Wu Hongli, Yuan Lihong, Yang Hongyan, Ouyang Pingkai* (College of Life Science and Pharmacy, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009,China) Abstract Dioscorea zingiberensis C.H. Wright callus cultured on MS medium supplemented with different hormones was studied. The result showed that the callus cultured on MS medium supplemented with NAA 0.2mg/L and BA 2.0mg/L was suitable for suspension culture. Effects of hormones and pH value on the establishment of cell suspension culture of Dioscorea zingiberensis C.H. Wright were studied. Cell suspension culture line of Dioscorea zingiberensis C.H. Wright with similar in shape, rapidly-growing and well-dispersed was established in liquid MS medium supplemented with NAA 2.0mg/L and BA 0.2mg/L and pH 5.5~6.0. The results may provide a scientific basis for the cell suspension culture of Dioscorea zingiberensis and the production of secondary metabolites. Keywords dioscorea zingiberensis, cell suspension culture, carbon source, pH, Hormones 盾叶薯蓣 （Dioscorea zingiberensis C.H. Wright）为薯蓣科薯蓣属植物，是我国特 有的薯蓣种类，其根茎 （俗称黄姜）中薯蓣皂甙元含量较高。薯蓣皂甙元 （diosgenin），是 合成多种甾体激素类药物 （如可得松）和甾体口服避孕药比较理想的前体,世界各国生产的 [1,2] 甾体激素60%以上以它为原料 。其结构经改造和合成后，可得