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微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析方法

维普资讯 第 36卷 第 2期 卫 生 研 究 V01.36 No.2 2007年 3月 JOURNALOFHYGIENERESEARCH Mat. 20o7 187 文章编号:1000.8020(2007)02.0187.03 · 论 著 · 微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析方法 孙蔚榕 黄飚 时瑾 江涛。 蔡正森 赵晓联 江苏省微生物研究所 ,无锡 214063 摘要:目的 建立高灵敏的微 囊藻毒素 (MC.LR)的时 间分辨荧光间接竞争免疫分析 方法 (MC.LR- TRFIA)。方法 以MC.LR与牛血清 白蛋 白的偶联物(MC.LR.BSA)包被 96孔板为 固相抗原,与游离MC.LR共 同竞争有限的抗MC.LR多克隆抗体;用稀土离子Eu3标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果 该方法的灵敏度 为 0.01pg/L,测量范围为 O.01—20ttg/L,ED80、ED50和 ED2O分别为O.16、O.57和 1.70~/g/L。平均 回收率为 101%,与 MC.LF和 MC.RR平均 交叉反 应 分 别 为 O.73%和 35%。比较 MC.LR-TRFIA和 MC.LR.ELISA检 测 MC.LR,两者的相关系数为O.958。研究表明,MC.LR.TRFIA是 目前报导的MC.LR检测中最灵敏的方法。结 论 该方法适用于水样 中MC.LR的定量检测 。 关键词 :微囊藻毒素 时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA) 免疫分析 中图分类号 :R446,61 Q一331 Q949,22 文献标识码:B Theuseofultrasensitivetime-resolvedfluoroimmunoassay forrapiddetectionofmicrocysfinLR SUN Weirong,HUANG Biao,SHIJin,JIANG Tao,eta1. JiangsuInstituteofMicrobiology,Wuxi 214063,China Abstract:0bjL~tive Inordertoprovidearapidandselectivitymethodf0rtlledeterminationofmicrocystinLR(MC— LR).Methods Anindirectcompetitivetime.resolvedfluoroimmunoassay(TRFIA)wasdeveloped.MC.LR.BSA was coatedbyphysicaladosrptionontohtemicrotitreplate.MC—LR orsamplewiht MC—LR asa competitor.Boht htem were incubatedwiht limitedanti—MC—LRantibody.nadagoatantirabbitIgG-Eu3 conjugatewasusedasatracer Results ThesensitivityofMC—LR—TRFIAwasO,01ttg/L.andhterecoveryratewas99.7% .RSD ofCBI,TRFIAwere3.9% .The sensitivityofMC—LR—

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