分离浓缩的β葡萄糖苷酶降低京尼平制备损失率的研究.pdfVIP

2011年 1月 四川大学学报 (自然科学版) Jan．2O11 第48卷 第 1期 Journa1ofSichuanUniversity(Natura1ScienceEdition) Vo1．48 No．1 doi：103969／j．issn．0490—6756．2011．01．042 分离浓缩的 葡萄糖苷酶降低京尼平 制备损失率的研究 苏 建 ，高 陪，沈 竞 ，孙启玲 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064) 摘 要 ：为了减少京尼平在酶解制备过程 中的损失，通过硫酸铵盐析及 DEAE—Sepharos52离 子交换层析对黑曲霉发酵产生的 葡萄糖苷酶进行分离浓缩，比活由1．09U／mg提高到8．17 U／mg，京尼平损失也从 45．7 降低到 7．7 左右 ，从而提 高了京尼平的得率；另外 ，通过海藻 酸钠 固定 葡萄糖苷酶 ，使酶的有效使用次数达到五次以上，提 高 了酶的使用效率 ，降低 了成 本 ． 关键词 ：京尼平； 葡萄糖苷酶 ；分 离浓缩；固定化酶 中图分类号 ：Q5o3 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756(2011)01—0237—04 Segregatedandconcentrated glucosidasereducethe lossratioofpreparedgenipin SUJian，GAOPei，SHEN Jing，SUN Qi—Ling (KeyLaboratoryofBio—resourcesandEco—environmentofMinistryofEducation， CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China) Abstract：Inordertoreducetheprobabilityofgenipinlossduringtheenzymereaction，the glucosidase obtainedfrom Aspergillusnigerwasseperatedand condensedtohomogeneitybyfractionalammonium sulphateprecipitationandthen ion—exchangechromatographyonDEAE—Sepharos52．The glucosidase specificactivitywasincreasedfrom 1．09U／mgto8．17U／mg；thegenipinlosswasreducedfrom45．7％ to7．7 ；and greatergenipin yeildwasthereforeobtained．In addition．theenzymeactivitywasim— proved(usedfivefimesorabove)byusingalgintoimmobilize5-glucosidase． Keywords：genipin， glucosidase，segregationandconcentration，immobilizedenzyme 解能力强 、细胞毒性小 、生物相容性好等优点 ，有望 1 引 嗣 取代戊二醛、碳化二亚胺等化学交联剂[】]．但是在 京尼平 (genipin)是 中药栀子 中的环烯萜类物 栀子 中京尼平的含量很低 ，为 0．005 ～0．01 ， 质 ，不仅具有增强记忆力、抗癌 、抗氧化和降压等重 主要是 以其前体——京尼平苷形式存在，含量为