枇杷叶中三萜类化学成分的分离与鉴定.docVIP

精品论文 参考文献 枇杷叶中三萜类化学成分的分离与鉴定 龚如东 陈改敏 (南阳医学高等专科学校 河南南阳 473061） 【摘要】目的 枇杷叶中三萜类化学成分的分离与鉴定。方法 采用各种色谱技术分离纯化三萜类化合物，根据理化性质及波谱数据鉴定结构。结果 从细枇杷叶中分得6个结晶。结论 从枇杷叶中可以提取到二十三碳酸、苯丙酸、芦丁、2beta;，3beta;，19alpha;-三羟基乌苏-12-烯-28-酸、蔷薇酸、橙花叔醇-3-O-alpha;-L-吡喃鼠李糖基( 1rarr;4) ndash;alpha;-L-吡喃鼠李糖基(1rarr;2) - [alpha;-L-吡喃鼠李糖基(1rarr;6) ] ndash;beta;-D-吡喃葡萄糖苷。 【关键词】枇杷叶 三萜类 化学成分 分离 鉴定 【中图分类号】R284.1 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2012）31-0284-02 枇杷叶系蔷薇科枇杷属植物枇杷的干燥叶，收载于历版《中国药典》供临床使用，别名巴叶、芦桔叶，目前从枇杷叶中分离的有效成分主要有挥发油、三萜酸类、倍半萜类、黄酮类、多酚类、有机酸类等，具有抗炎止咳、降血糖、抗病毒和抗肿瘤等药理活性。 1 材料和仪器 熔点用BUCHIB-540可视熔点测定仪(230V/50Hz)测定(温度未校正)；红外光谱用IR-435型红外光谱仪测定；核磁共振谱用VarianInova-400型核磁共振仪测定；质谱用Agilent1100型质谱仪测定。色谱用正相硅胶(100～200，200～300mesh)，RP-18(40～63mu;m)；SephadexLH-20；色谱用溶剂均为分析纯。枇杷叶，呈长圆形或倒卵形，长15～30cm，宽4～9cm。先端短尖，基部楔形，边缘有疏锯齿，近基部全缘。上表面灰绿色、黄棕色或红棕色，较光滑；下表面密被黄色绒毛，主脉显著突起，侧脉11～12对，羽状，直达锯齿顶端；叶柄极度短，被棕黄色绒毛。革质，无臭，味微苦。 2 提取和分离 取干燥枇杷叶5kg，粉碎，75%乙醇回流提取3次，减压浓缩后置于80℃恒温水浴中挥去乙醇，4000r.min-1离心30min，取上清液，置于沸水浴中挥去水分，得浸膏1000g。浸膏用适当体积蒸馏水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇萃取，得到极性不同的4个萃取部分。乙酸乙酯萃取部分(75g)经硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱分段；各部分用硅胶柱、RP-18反相硅胶柱、SephadexLH-20柱反复层析进一步分离，分别得到化合物Ⅰ(8mg)、化合物Ⅱ(40mg)、化合物Ⅲ(8mg)和化合物Ⅴ(43mg)。正丁醇萃取部分(120g)上大孔树脂D-101柱，以水-乙醇梯度洗脱，40%和70%乙醇洗脱部分用常规柱层析手段进行再次分离，分别得到化合物Ⅱ(74mg)和化合物Ⅵ(65mg)。 3 鉴定 化合物Ⅰ:白色针晶(石油醚)，mp:104℃～105℃，相对分子质量354，不溶于无机酸，易溶于碱，判定该成分可能为脂肪酸，推测分子式为C23H46O2。 1HNMR(CDCl3，300MHz):delta;0.86、0.88、0.90(3H，t，-CH3)，1.26～1.67(40H，m，CH2times;20)，2.00～2.03(2H，m，CH2)，7.25(-COOH)。故推断化合物Ⅰ为二十三碳酸(tricosanoicacid)。 化合物Ⅱ:白色粉末(氯仿)，mp:214℃～216℃；1HNM R(CD Cl3，300MHz):delta;1.26处积分为4H的峰可能为2个-CH2，delta;7.45～8.14为5个芳香氢信号，提示可能有苯环。13CNM R(CDCl3，75MHz)中，delta;29.6和delta;29.7提示有亚甲基信号，delta;128.5～133.8提示有6个芳香碳信号，delta;172.1提示有羰基信号，与标准图谱对照，确认化合物Ⅱ为苯丙酸(phenylpropylacid)。 化合物Ⅲ:黄色晶体(甲醇)，mp:178℃～179℃；盐酸-镁粉反应呈阳性，AlCl3反应呈黄绿色荧光，Molish反应呈阳性，提示该化合物可能为黄酮苷类成分；其Rf值和显色反应与标准品芦丁相同，混合熔点不下降。 13CNMR谱与芦丁标准图谱一致，故确定化合物Ⅲ为槲皮素-3-Ondash;beta;-D-吡喃葡萄糖(6rarr;1)-alpha;-L-鼠李糖苷，即芦丁(rut