聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测定低密度脂蛋白的条件探讨研究.pdfVIP

聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测定低密度脂蛋白的条件探讨 1 1 2 范婷婷 ，杨新芳 ，王新宇 （1，北京理工大学生命科学与技术学院，北京 100081 ；2 ，北京市高血压联盟研究所，北京 10043 ） 摘要：小而密低密度脂蛋白与冠心病的发生有着密切关系。采用聚丙烯酰胺梯度凝胶法对血浆中的低密 度脂蛋白进行分离，考察电压对脂蛋白条带形成的影响。方法：灌注3%～16%聚丙烯酰胺梯度凝胶，超 速离心法处理新鲜血浆，血浆直接进样。结果表明，在采用低电压条件 30V ×1h，70V ×2h ，150V×8h 时，所得电泳条带清晰。 关键词：聚丙烯酰胺梯度凝胶法；小而密低密度脂蛋白；电压 Study on the Polyacrylamide Electrophoresis Method of Low Density Lipoprotein 1 1 2 FAN Tingting , Yang Xinfang and WANG Xinyu (1 School of Life Science Technology, Beijing Insititute of Technology, Beijing 100081, China；2 Beijing Institute of Union 0f Hypertension ，Beijing 100043, China ) Abstract ：Small and dense low density lipoproteins are associated with risk of coronary heart disease. We use the polyacrylamide gradient gel to isolate lipoprotein from plasma, then have researched the influence of different voltage condition on lipoprotein band. Method: Prepare 3%～16% polyacrylamide gradient gel and plasma is applied directly. To get the best lipoprotein band, we change the electrophoresis voltage and electrophoresis time and discuss the influence of electrophoresis voltage. Key Words: polyacrylamide gel electrophoresis; low density lipoprotein; voltage ∗ 联系人：杨新芳. Corresponding author: Yang Xinfang. E-mail ：xinfangy@bit.edu.cn 范婷婷（1985- ），女，硕士研究生. 低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL ）在颗粒大小、密度、脂质组成上存在明显的异质性。一 般地，LDL颗粒分为两大类亚组份[1] ：一类是小而密LDL ，颗粒直径≤25.5nm ，密度为1.044～1.063g/ml； 另一类是大而疏LDL ，颗粒直径＞25.5nm ，密度为1.019～1.044g/ml。血浆中的低密度脂蛋白如果以小而 密LDL为主，则称其为B型；反之，如果以大而疏LDL为主，则称其为A型。近年来研究发现，小而密LDL 与冠心病的发生有着密切关系。与大而疏LDL相比，小而密LDL 的颗粒小，更容易进入动脉壁，进而进 入血管内膜，与LDL受体的亲和力降低，在血浆中的存留时间较长，且抗氧化能力较弱，易被巨噬细胞 吞噬变成泡沫细胞而自行沉积