重复原则在骨科实验设计中的应用.PDFVIP

ChinaJ 中国骨伤2009年lO月第22卷第lO期 ·继续教育园地· 重复原则在骨科实验设计中的应用 胡良平，王琪，陶丽新，毛玮 (军事医学科学院生物医学统计学咨询中心，北京 100850) J ZhongguoGushang／ChinaOrthopTrauma，2009，22(10)：800-802www．zggszz．conl 维生素C50 d诱导培养后，倒景显微镜 实验设计是科学研究的一个重要环节，良好的实验设计 gmol／L]，经7、14、21 是顺利进行科学研究和数据分析的先决条件，也是获得预期 观察细胞形态，免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原 结果的重要保证…。科学研究的目的，是为了揭示事物的客观 表达。将软骨细胞与软骨支架材料——聚磷酸钙纤维／左旋聚 规律。研究的价值首先决定于研究的目的，而研究的结果是通 乳酸(CPP／PLLA)聚合，1周后终止培养，扫描电镜观察细胞 过一定方法步骤而获得的。一个周密的实验研究全过程，通常 黏附情况。诱导后细胞体外扩增能力显著降低，细胞形态由成 要联系质的特性，研究量的表现，所以从统计方面讲，主要应 纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变，诱导21d后细 考虑随机、对照、重复、均衡等问题。这是实验研究的一般原 胞形态变化最为显著，Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀。诱导 则。实验要求一定重复数(样本例数)，其目的是使均数逼真， 后的骨髓间充质于细胞町在支架材料内良好黏附牛长。结论为 并稳定标准差，只有这样来自样本的统计量才能代表总体的 体外培养的骨髓间充质干细胞可定向诱导分化为软骨细胞， 参数，统计推断才具有可靠的前提[2]。 分泌软骨细胞特异性基质，可用作软骨组织工程的种子细胞。 l重复的含义 例2《间歇性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的 重复通常有三层含义，即“重复取样”、“重复测量”和“重 影响》№]一文，以1只出生1个月的新西兰兔的骨髓基质干细 复实验[310从同一个样品中多次取样，测量某定量指标的数胞为实验材料，将生长良好的第34代MSC按lxl04个／孔 值，称为“重复取样”，目的是看各标本中某定量观测指标含量 随机接种于4块24孔培养板。14h后细胞完全贴壁，换新鲜 的分布是否均匀；对接受某种处理的个体，随着时间的推移， 含10％胎牛血清的DMEM(含lU几青霉素及100ms／L链霉 对其进行多次观测，称为“重复测量”，目的是看定量指标随时 素)。按压力施加类型不同分为持续性和间歇性压力，每块培 间推移(或部位改变)的动态变化情况；实验设计中所讲的重 养板的细胞为1个大组，随机将4块培养板分为4个大组即： 复原则指的是“重复实验原则”，即在相同的实验条件下的独 对照组、20 立莺复实验的次数足够多。这里的“独立”是指要用不同的个 组按观察期分为4个小组即：l、3、5、7d组，每小组样本(细 体或样品做实验，而不是在同一个体或样品上做多次实验。 胞)为6孔。对照组不予加压，20、60、100kPa间歇组分别在每 rain 2重复原则的作用 天施以20、60、100kPa的压力52次。结果：MSC在60、 100 当人们关心的实验结果是一个不能事先准确判定的某种 kPa间歇性压力培养环境下M1Tr反应的OD值小于对照 结局时，一般称其为“随机变量”的一种具体表现，如某种药物 组；压力值