龙须菜多糖脱硫酸化及免疫活性研究.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（３）：４７～５０ 龙须菜多糖脱硫酸化及免疫活性研究 １ ２ ２ １ 宫春宇 　张劲松 　唐庆九 　潘迎捷 （１上海海洋大学食品学院　上海　２０００９０　２上海市农业科学院食用菌研究所　上海　２０１１０６） 摘要　考察了Ｍｉｌｌｅｒ等和Ｎａｇａｓａｗａ等报道的脱硫酸方法对龙须菜多糖硫酸基脱除效果，并比较了 脱硫酸前后多糖的免疫活性变化。实验结果显示，采用Ｍｉｌｌｅｒ等报道的方法时，以草酸作为催化剂 对硫酸基脱除效果最好，脱除率达到７１．４％，远好于其他种类酸催化，但多糖回收率却只有３６．４％； 采用Ｎａｇａｓａｗａ等报道的方法时，向二甲基亚砜溶液中加入 １０％甲醇比加入２％吡啶或２％吡啶＋ ２％三甲基氯硅烷具有更好的脱硫酸基效果，硫酸基脱除率达到７２．９％，回收率４８．９％，是本次实验 中效果最好的。免疫活性实验表明，当降低龙须菜多糖硫酸基含量时，免疫活性相应降低。 关键词　龙须菜　多糖　硫酸基　脱硫酸作用　免疫活性 中图分类号　Ｑ５３ ［１３］ ［１４］ 　　研究表明硫酸基与多糖生物学活性有着密切关 文献报道龙须菜多糖具有抗突变 、抗肿瘤 、清除 系，是否有硫酸取代、取代度及取代位置往往影响到多 ［１３］ ［１５］ 自由基 和抗氧化作用 等生物学活性。但对龙须 ［１～６］ 糖的生物学活性有无和活性大小 。因此，确定硫酸 菜多糖的研究才刚刚起步，研究往往只涉及对粗多糖 多糖中硫酸基的取代位置是硫酸多糖构效关系研究中 生物活性的探讨，而更深层次研究如：多糖纯化、多糖 重要工作之一，并且也是解析硫酸多糖结构时必需研 结构、构效关系和作用机理还有待进行。 究清楚的问题。目前确定硫酸基取代位置的有效方法 　　因此，为达到脱除硫酸基以进行龙须菜多糖深层 是比较有硫酸基取代和没有取代糖链的不同。因此， ［１０］ 次研究的目的，本文考察了Ｍｉｌｌｅｒ等 报道的一步脱 找到一个有效便捷的脱硫酸基方法就十分必要。 ［９］ 硫酸基方法和Ｎａｇａｓａｗａ等 报道的两步脱硫酸基方法 　　最先使用的脱硫酸化试剂是氯化氢甲醇溶液，此 （首先将多糖转化为其吡啶盐，再用二甲基亚砜离解多 溶液对硫酸基的离解作用很强，即使对像硫酸软骨素 糖吡啶盐脱硫酸基）在龙须菜多糖脱硫酸作用中的应 那样以稳定的糖苷键相连的硫酸基也有很好的脱除效 用效果，以期对以后涉及到红藻多糖脱硫酸化方法选 果。但其缺点是破坏力过大容易造成其他类型糖苷键 择时有所借鉴。本文还比较了脱硫酸化后龙须菜多糖 断裂，从而引起多糖降解，对于含有不稳定３，６内醚键 免疫活性的变化，初步揭示了硫酸基与生物活性之间 的半乳聚糖就更难运用此试剂进行脱硫酸基。随着研 关系。 究的深入许多其他脱硫酸方法逐渐建立起来，这些新 方法大都基于同一原理，即利用二甲基亚砜溶液的溶 １　材料与方法 剂离解作用脱硫酸