发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR反应条件的建立与优化 Establishment and Optimization of Microbial 16S rDNA PCR Reaction Conditions in Fermentation Bed Padding Material.pdfVIP

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2018-01-12 发布于上海
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发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR反应条件的建立与优化 Establishment and Optimization of Microbial 16S rDNA PCR Reaction Conditions in Fermentation Bed Padding Material.pdf

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发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR反应条件的建立与优化 Establishment and Optimization of Microbial 16S rDNA PCR Reaction Conditions in Fermentation Bed Padding Material

农业资源与环境学报 Journal of Agricultural Resources and Environment 2014 10 31 5 470-475 October 2014 Vol.31 No.5 470-475 年月·第卷·第期： · · ：发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR 反应条件的建立与优化 * ，，，，，，杜东霞尹红梅张德元标许隽王震贺月林， 4 10009 ）（湖南省微生物研究院湖南长沙摘要：为探讨发酵床垫料中微生物 16S rDNA 基因扩增实验中诸多因素对实验结果的影响，用单因素法对 16S rDNA 基因扩增 PCR 5 Mg2+ dNTP Taq DNA 5 时反应体系中的个潜在因素（、、引物、酶、模板）水平上进行优化实验，并进一步优化了反应程序中的 25 μL 10×PCR buffer 2.5 μL MgCl 2.0 mmol L-1 dNTP 0.2 mmol L-1 0.2 退火温度、循环次数。结果表明：的最佳反应体系为：、 2 · 、 · 、引物 μmol L-1 Taq DNA 0.5 U DNA 50 ng ：在94 ℃ 4 min 25 包括 · 、聚合酶、模板；最佳反应程序为下进行预变性；随后循环扩增个循环（ 94 ℃ 45 s 53.7 ℃ 30 s 72 ℃ 90 s 72 ℃ 10 min 变性，退火，延伸）；最后在下延伸。 16S rDNA ：；退火温度关键词发酵床垫料；单因素法； Q93-331 A 2095-6819 20 14 05-0470-06 doi: 10.13254/j .jare.2014.0 102 中图分类号：文献标志码：文章编号：（） Establishment and Optimization of Microbial 16S rDNA PCR Reaction Conditions in Fermentation Bed Padding Material DU Dong-xia, YIN Hong-mei, ZHANG De-yuan, LIU Biao, XU Jun, WANG Zhen, HE Yue-lin* Hunan Academy of Microbiology, Changsha 4 10009, China （） Abstract: In ord