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春雷霉素生产菌株NSS94的选育及其
发醉工艺的研究
朴顺爱 崔英兰
(延边农药厂 延吉 133000)
摘要 从现有的春雷霉素产生菌变异株中挑选表型较好的一株，对其进行NTG诱变和自然
分离，得到NSS94菌株，该菌株不但产童高，还具有德定的遗传性能.在其发醉工艺的研究中若
重搞了发酵配方的改反，在经过优化的发酵配方中，NSS94其2t级发酵试脸雌效价达到了
10921ug/ml,为春雷霉素大批生产打下了良好基础.
关健词 春雷霉素生产菌 NTG诱变 发眯配方
长期以来，春雷零素作为防治水稻码痹病的生物农巧一直浑受广丰用户煦好评，目前该药
在国内独家生产。但激烈的市场竞争和日益发展的农业需求告诉我们春雷霉素要在质和量上应
不断有新的突破，这就要求我们必须积极开发高产稳产的春雷霉素生产菌株的同时优化其发酵
上艺。本实验室以诱变处理和自然分离相结合的方法选育了下株遗传性能稳定的高产菌株，改
良了现有的发酵配方，使得春雷林素发酵效价有了明显提高，为我厂大批生产春雷霉素以满足
社会需求，奠定了良好基础。
1材料与方法 1 ;
1.1菌株
春雷霉素小金色链霉菌($treptomycesmicroaureus).730突变株 本〔厂保存的，，‘
1.2培养基
1.2.1斜面培养基和平板分离培养荃(%) 豆饼粉1.0，甘油1.0,琼脂2.5,!蛋自膝0.3,N:aCl0.25,
PH7A,CACo30,2e
1.2.2发酵培养基 (%) 豆饼粉6.5，豆油2.5,40/o怡糖2.5,NaC10.3,KH,PO,0.02,
1.2.3侧定培养基 (%) 上层培养基为蛋白脉0.3%,菊萄糖0.3,Na,HP040.4琼脂1.5,PH8.0,
层「培养基为Na,HPO,0.4，琼脂1.5,PH8.0.
1.3培养条件
斜面和平板分离培养12d:发酵装量为250m1三角瓶含有25ml发酵液，周期7d，摇床转数
为240r/min;培养温度均为28C.
1.4侧定方法
生物效价的测定用管碟法m。指示菌为枯草杆菌((Bacillussubtilis)AS1.338,37℃培养18h后
测定抑菌圈大小，查照标准曲线，即可计算春雷霉素效价。
1.5诱变方法
1.5.1抱子悬浮液制备 用无菌生理盐水洗 卜斜面抱子，经玻璃珠打散，用脱脂棉滤去菌丝片段，
制成含抱子】X10。个/ml左右悬浮液。
1.5.2NfG处理 常规方法121
1.6筛选方法
诱变 初筛
采用常规法131出发菌敬--0.分离在平皿上-一枷挑选菌落一-一州卜
瓶尹株
3-5株 (提供第二次分离的出发菌株.)
2结果与讨论
21‘菌株的诱变选育
对现有的砂土管所有菌株进行摇瓶测定，挑选一株表型较好的菌株，通过自然分离进行纯
化 ， 获得110菌株，对110菌株进行NTG诱变与自然分离，选得NSS94。其结果如下:
白状分离 NTG 自然分离 自然分离
一一一一卜NSS94
峨菌株一 11一‘.九 “一 NS149
在选育过程中每轮筛选所得菌株的效价提高幅度情况如表1
表1帅选过程中蔺株效价水平
菌株 N68 NS149 NSS94
效价uglml 7503 9162 9639 10975
相对效价 100
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