水产品中氟喹诺酮类多残留检测方法的研究.docVIP

精品论文 参考文献 水产品中氟喹诺酮类多残留检测方法的研究 杨燕芬 陆亦在 　　广西南宁市疾病预防控制中心 530023 　　摘要：氟哇诺酮类药物因其具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用方便等特点，被广泛应用于兽药临床和水产养殖中。水产品中氟喹诺酮类药物残留不仅会给动物性食品安全带来潜在隐患，也会对人类的健康及生存环境造成危害。提供准确的水产品氟哇诺酮类药物多残留检测方法成为食品安全监测一项刻不容缓的任务。本文对该类药物在水产品中的残留分析方法进行综述和合理的展望，旨在为进一步开展水产品中氟哇诺酮类药物残留研究和监测提供借鉴。 　　关键词：氟喹诺酮类药物残留；水产品；检测方法 　　氟哇诺酮类（Fluoroquinofones，FFQs）是一类人工合成的广谱抗菌药，是第三代喹诺酮类药物，药物通过抑制细菌的DNA回旋酶，影响拓扑异构酶Ⅳ，干扰细菌的DNA复制而阻碍细菌DNA 合成，最终导致细菌死亡而抗菌。此类药物属吡酮酸衍生物，喹啉环的C-6位上有氟原子，C-7位上连接哌嗪基或吡咯基，加入氟原子后增加了其脂溶性，增强了对组织细胞的穿透力，因而吸收好，组织中药物浓度高，半衰期长，大大增加了抗菌谱和杀菌效果。FQs药物具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用方便、不良反应小，以及价格低廉等特点，20余年来已成为发展最快的化学合成抗菌药物，在临床上广泛用于人类和动物的各种感染性疾病的治疗[1]，其主要有诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、单诺沙星和达氟沙星等。随着氟喹诺酮类药在兽医临床和水产养殖中的应用，其残留问题已引起了广泛的关注[2]。本文就水产品中氟喹诺酮类多残留检测方法简要综述。 　　1、水产品氟哇诺酮类使用现状 　　随着我国水产养殖业的不断发展，抗生素在水产养殖业的应用越来越广泛，抗生素的应用有效地预防和控制了许多水产感染性疾病的发生、促进动物生长和提高饲料的利用率极大地促进了水产养殖业的发展。氟哇诺酮类因抗菌谱广、抗菌作用强、使用方便等特点近年来在水产养殖中大量使用。而违规使用兽用抗生素、不执行休药期规定等，最终导致氟哇诺酮类在水产品体内残留超标。兽用喹诺酮类药物残留不仅对人体造成急慢性不良反应，有潜在的致癌性和遗传毒性，容易使病菌产生耐药性，而且造成生态环境污染，严重威胁食品安全。叶计朋等[3]报告：珠三角重要水体中枯季水体中氧氟沙星和诺氟沙星的含量要明显高于瑞士一些河流中药物的含量，与该国家污水处理厂的含量水平相当，这在很大程度上反映了氟喹诺酮类药物在我国具有较高的用量，细菌耐药性的不断增强和环境雌性化是当前人类面临两个重要健康挑战，它们都和药物的使用和污染有关。因此，对水产畜牧业合理使用抗生素已经成为食品安全和养殖业健康发展中一个不容忽视的问题。目前，我国、欧盟以及日本都已制定了多种氟喹诺酮类药物在动物组织中的最高残留限量[4]，因此，加强对兽药氟喹诺酮类药物多残留监测显得尤为重要。 　　2 氟哇诺酮类残留检测方法 　　2.1 酶联免疫法（competitive indirect ELISA，ci-ELISA） 　　酶联免疫法是70年代在放射免疫分析法的基础上发展起来的一种新的免疫分析法，它将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高专一性、特异性相结合，以酶标记的抗原或者抗体作文主要试剂的免疫测试方法，具有很高的灵敏度，检测下限可达到ng甚至pg水平。近年来它在临床检验、生化分析、疾病预防等方面有着广泛的应用[5]。由于氟喹诺酮是半抗原，它不能刺激机体产生抗体，因而要使半抗原性物质具有免疫原性就需使其与大分子载体物质（蛋白质）相结合制备人工抗原，而后将其作为抗原进行免疫，动物体内即可产生体异性抗体。然后建立酶免疫竞争法测定氟喹诺酮含量。胡鲲等[6]建立了基于单克隆抗体的间接竞争酶联免疫法，并比较了其与高效液相色谱法在灵敏度、准确性和重现性等方法学参数上的差异。实验结果显示，经过浓缩、净化等前处理过程，ci-ELISA 与HPLC的检测灵敏度分别可以达到10 mu;g/kg和 1 mu;g/kg，回收率分别为79.28 % -92.92 %和 86.27 % -97.32 %，相对标准偏差分别在3.21 %-8.88 %和2.66 %-5.52 %。实验结果表明前者经济、高效，适合作为初筛方法大批量筛选样品；后者灵敏度、重现性更好，适于在实验室条件下作为验证方法。酶免疫测定法特点：试样预处理简单、特异性强，由于抗体的批次不同，测定结果可能出现微小差异，灵敏度不高。 　　2.2 胶体金免疫测定法（Colloidal gold immunoassay assay，CICA） 　　胶体金免疫测定法（CICA）测定动物性食品中FFQs方法是用胶体金标记检测抗原的抗体，通过抗原抗体的特异性反应，形成肉眼可见的条带的检查方法。李向梅等[