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第三章__培养基的制备和灭菌设备
第三章 培养基的制备设备 主要内容:第一节 培养基的灭菌设备 第二节 原料的蒸煮与糖化设备 第三节 麦芽汁的制备设备 第四节 淀粉水解制糖设备 学习要求:掌握培养基的分批灭菌计算、连 续灭菌流程和设备的结构及设计 了解培养基制备设备的结构和设计 第一节 培养基的灭菌设备 一、灭菌的基本理论 二、分批灭菌过程与计算 三、连续灭菌流程与设备 一、灭菌的基本理论 (一)灭菌目的 1. 避免生物反应的基质或产物,因杂菌的消耗而损失,造成生产转化率的下降 2. 杂菌的代谢物质,会使所要产物的提取和分离变得困难,造成收得率降低或使产品质量下降 3. 有些杂菌会分解产物,或噬菌体裂解生产菌细胞,使生产失败 灭菌:射线灭菌、药物灭菌、热灭菌 分离:离心沉淀、介质过滤 (三)加热灭菌方式 培养基→加热升温→维持保温→冷却降温→发酵 分批灭菌:三个过程在一个设备内完成 连续灭菌:三个过程分别在不同的设备内完成 (四)灭菌要求 达到无菌程度 尽量减少营养成分损失 降低能量消耗 二、分批灭菌过程与计算 (实罐灭菌或实消) 升温:将培养基置于发酵罐中用蒸汽加热 保温:达到预定灭菌温度后维持一定时间 降温:冷却到发酵温度后接种发酵 维持保温阶段 (二)分批灭菌特点 (三)分批灭菌的计算 1、灭菌操作时间 式中:τ1—间接加热时间,h G—培养基的质量,Kg C1—培养基的比热,kJ/kg.℃ K—总传热系数, kJ/m2.h.℃ F—传热面积,m2 T—加热蒸汽温度,℃ t1—加热前培养基的温度,℃ t2—加热后培养基的温度,℃ 维持保温阶段(维持灭菌温度到灭菌时间) 维持保温时间: km—τp阶段的平均灭菌速率常数,s-1 冷却降温阶段(间接冷却到发酵温度) 冷却降温时间:(双变量不稳定传热) 培养基: 分批灭菌讨论: 对于工业规模的灭菌操作,完成整个灭菌周期一般约需3h~5h,其各阶段对灭菌效果贡献大致如下: N加/N总=20% N保/N总=75% N冷/N总=5% 习题:有一发酵罐,内装培养基18.5m3,于121℃下进行实罐灭菌。若每毫升培养基中含耐热芽孢杆菌2×107个,灭菌失败几率是10-3,试求 不计升、降温阶段的灭菌作用,灭菌所需时间? (logK=-14854/T+36.127) 其它条件不变,培养基体积增大一倍,灭菌时间是多少? 若已知升降温阶段培养基从100℃升至121℃共需15min,那么升温结束时,培养基中残存芽孢数及在121℃保温时间? 若发酵罐的传热面积为25m2,则用2kg/cm2(表)的蒸汽间接加热使培养基由25℃升至90℃,所需时间?(K=4.187×400KJ/m3·h· ℃ 、 ρ=1000kg/m3) 若用10℃的冷却水,冷却灭菌后的培养基,将其从121℃降至30℃。已知当培养基降至80℃时,冷却水出口温度为30℃,求冷却水用量及冷却时间? 三、连续灭菌流程与设备 ①.加热设备:加热均匀, 快速升温到灭菌温度 (温度一致) ②.维持设备:使培养基按顺序流动,维持灭菌温度达到灭菌时间 (时间一致) ③.冷却设备:传热速率高,尽快冷却到发酵要求温度,密封性好,回收热能 3、流程 ①.连消塔加热-喷淋冷却连续灭菌流程 ②.喷射加热-真空冷却连续灭菌流程 特点 ③.板式换热连续灭菌流程 流程:薄板换热器加热、管道维持、薄板换 热器冷却 特点 在一台薄板换热器中完成培养液的预热、加热及冷却三个过程 培养液的预热过程同时为灭菌后培养液的冷却过程,减少了加热蒸汽和冷却水的用量 结构 设计 结构 计算 容积: (3)冷却设备 套管换热器 使用:内管走热培养基,内外管的间隙中走冷却水 优点:结构简单,易于维修和清洗 适用于高温、高压流体,特别是小流量流体的换热 缺点:流动阻力大,需要较多制造材料 组成部件:换热板、密封垫片、压紧装置 换热板是用1mm厚不锈钢板由水压机冲压成型 密封垫片放置于每片板的周边和两个孔口,用于密封并分成两个流体通道 调节密封垫片厚度可改变流体通道大小 压紧装置将叠合在一起的各传热板压紧,使密封垫片起到密封作用 特点 流程 冷热流体不同流程 计算 1、传热面积F: 第二节 淀粉质原料的蒸煮与糖化设备 一、连续蒸煮糖化流程 二
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