透析和超滤PPT.pptVIP

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透析和超滤PPT

透析和超滤 (Dialysis and Ultrafiltration) ;1.透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜而进行纯化的一种方法。有以下几种方法: 脱盐透析:将含盐的生物大分子溶液装入透析袋内。并将袋口扎好放入装有蒸馏水的大容器中,用搅拌方法使蒸馏水不断流动经过一段时间后,透析袋内除大分子外,小分子盐类透过半透膜进入蒸馏水中,使膜内外盐浓度达到平衡。如在透析过程中更换几次大容器中的液体,可以使透析袋内的溶液达到脱盐的目的。脱盐透析是应用最广泛的一种透析方法。;平衡透析:也是常用的透析方法之一。方法是将装有生物大分子的透析袋装入盛有一定浓度的盐溶液或缓冲液的大容器中,经过透析,袋内外的盐浓度(或缓冲液pH)一致,从而有控制地改变被透析溶液的盐浓度(或pH)。;反透析:将透析袋放入高浓度吸水性强的多聚物溶液中,透析袋内溶液中???水便迅速被袋外多聚物所吸收,从而达到袋内液体浓缩的目的。这种方法称为“反透析”。可用做反透析的多聚物有聚乙二醇(Polyethylene glycol, PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl Pyrrolidone, PVP)、右旋糖、蔗糖等。 透析用的半透膜很多,玻璃纸、棉胶、动物膜、皮纸等都可用来制作半透膜。;;;超过滤;;离子交换柱层析法分离蛋白质;;;;;;;;;操作要点 ;

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