临床病原学检查PPT.pptVIP

细菌感染检查项目的选择和应用 显微镜检查、分离培养、血清学试验、生化鉴定和PCR等核酸检测是细菌感染诊断的基本方法，①无菌性标本(血液、脑脊液、体腔渗出液)，采用显微镜检查和直接药敏试验可作出病原学诊断和提供用药指导；②脓血便，革兰染色无诊断意义，需用标记抗体染色镜检获初步报告，再经选择培养基分离培养，挑取可疑菌落作玻片血清凝集，阳性者可初步鉴定，配套生化反应可作出最后报告；③尿液标本，显微镜检查可初步估计细菌菌量，作出初步诊断，再经分离培养鉴定后和菌落定量计数可作出病原学诊断；④痰标本，采用显微镜检查，判定是否为合格标本，经过接种培养，检出致病性菌落，再进行鉴定和药敏；⑤对临床指征明确，只为获得病原学证实的细菌，常采用对某一种细菌检验程序。 病毒感染检查 真菌感染检查 真菌的抗体检测 1. 曲霉菌免疫扩散试验(immunodiffusion of Aspergillosiss) 血清学检测阳性者其培养结果阳性可考虑给予临床确诊。 2.芽生菌病血清学试验(serologic test of Blastomycosis) 包括有补体结合试验、免疫扩散试验和酶免疫试验。 3．念珠菌病血清学试验(serologic test of Candidiasis) 至今抗体检测无临床诊断价值。 4 ．球孢子菌病补体结合试验：具有临床诊断价值。对有症状患者而其双份血清抗体效价4倍增长或效价≥1：16可作出诊断。 5．隐球菌病血清学试验(serologic test of Cryptococcosis) 抗体检测无临床意义。利用胶乳凝集试验检测脑脊液中隐球菌的多糖抗原具有诊断隐球菌性脑膜炎的价值。 6．组织胞浆病血清学检测(serologic test of Histoplamosis) 补体结合试验单份血清抗体效价高于1：32或双份血清效价4倍增长可作现期感染诊断。 7．孢子丝菌病胶乳凝集试验(1atex agglutination of Sportrichosis) 抗体效价高于1：80有诊断价值。 真菌感染检查项目的选择和应用 直接显微镜检查是诊断浅部真菌感染的主要手段，通过涂片镜检查找菌丝和孢子可作出真菌感染诊断，再经培养、菌落性状观察，镜下孢子和菌丝形态特点，可作出对菌种的鉴定。深部真菌感染常取标本作培养，在观察培养物性状后，需借助理化特性作出菌种鉴别。血清学方法对深部真菌感染及二相型真菌感染具有一定诊断价值，依各种不同血清学方法对不同真菌有不同诊断价值。分子生物学技术是近年来发展的技术，目前较为成熟的rDNA探针已有试剂盒应用于诊断。 寄生虫感染检查 检测项目 (一)显微镜检查 1。粪便检查 ①新鲜粪便生理盐水涂片检查滋养体或包囊，根据滋养体和包囊形态特点，可诊断肠道阿米巴病、贾第虫病，查找带绦虫虫卵及孕节可作出带绦虫病诊断；②粪便抗酸染色检查隐孢子虫卵以诊断隐孢子病，同时也可作金胺“。”染色粪便涂片、荧光显微镜检查，可作为隐孢子虫病的筛选；③粪便重力沉淀法检查虫卵或孵化法检查毛蚴可有助于血吸虫病诊断；④粪便湿片法查找虫卵是诊断肠道蠕虫感染的可靠方法，包括对蛔虫病、鞭虫病、类圆线虫病和钩虫病。 2．十二指肠引流液检查 对粪便阴性者，可取十二指肠引流液直接镜检或离心浓集后镜检，其阳性率较高，可用于贾第虫病、阿米巴病、梨形虫病及隐孢子病检查。 3．血液涂片检查 分血薄片和厚片检查，血液涂片检查是确诊疟疾唯一根据，传统上用薄厚同时涂片方法，吉姆萨或瑞特染色，先在厚片中快速查找疟原虫，再在薄片中查找细胞内疟原虫。巴贝虫病的实验诊断也有赖于血涂片显微镜检查，形态颇似恶性疟原虫，不同的是无色素和配子体，在同一个红细胞内可见不同发育阶段的多个巴贝虫。 4．痰和支气管灌洗液检查 标本用粘液溶解剂处理后离心浓缩，沉渣涂片，染色镜检，乌洛托品染色后见棕褐色包囊和特征性括弧样结构，具有诊断价值。 5。阴道、尿道、前列腺分泌物检查 保暖的新鲜标本生理盐水涂片见运动活泼虫体，也可用标本涂片固定后吉姆萨染色，同时还可观察微生物病原体。 6．活检组织检查 组织切片或压片染色镜检，观察贾第虫原体、弓形虫游离或胞内滋养体、利什曼原虫的利一杜体，可对上述寄生虫感染作出诊断，直肠活组织检查、厂叮橙染色或氯化三苯四氮唑一茚三酮复染法可检出血吸虫虫卵并能鉴别虫卵的死活。 (二)抗体检测 利用血清学方法检查各类寄生虫的虫体抗原或机体对此产生的抗体，随着单克隆抗体的出现，使用比先前广泛。 (三)核酸检测 应用DNA探针检测标本中寄生虫DNA或RNA，目前已有：①“P标记恶性疟原虫全基因组DNA可检出0．0001％虫体浓度；②国内建立的杜氏利什曼原虫kDNA检测利什曼原虫；③克