临床生化检验与生化试剂PPT.pptVIP

一 临床检验与临床化学;临床检验;临床检验在医学中的作用; 临床生化检验;光学光谱区;光吸收基本定律: Lambert-Beer定律 Lambert－Beer定律时讨论溶液吸光度同溶液浓度和溶液层 厚度之间关系的基本定律，该定律时分光分析的理论基础。 K为比例常数，C为溶液浓度 （当液层厚度为cm，浓度单位为mol/L时，吸光系数K称为摩尔吸光系 数ε。ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时在特定波长 下的吸光度值。ε是物质的特征性常数） Lambert-Beer定律适用于可见光、紫外光、红外光和均匀非 散射的液体;吸光度与浓度的关系 A = ?bc; 一般对一个新的试剂来说，总是先做标准品定标（校准），再进行相应的样本检测。 多点定标和一点定标： 通过多个浓度有一定梯度的标准液来定标（校准），规范出标准曲线的一定的趋势，以此来得到浓度与吸光度的函数。多点定标大多用于非线性校准，得到的标准曲线一般为二次函数的抛物线类型。只用一个标准品来定标，得到的函数为Y（浓度）=AX(吸光度)+B，是一条简单的直线。; 生化分析基本测定方法 连续监测法（速率法）： 即连续监测反应过程，按产物的生成或底物的消耗的速度(△A/min)进 行定量分析的方法，读数点必须在等速区对低浓度的样本，它的吸光度随时 间变化的慢（速率低），而高浓度样本，它的吸光度随时间的快（速率 高）。在反应时间进程曲线上为反应呈恒速区段(斜率保持不变)，常用于酶 活性线性反应期测定或以酶为工具测底物（代谢物）的浓度。 终点法： 反应到达终点后与起始点（空白）的吸光度差与相同条件下用校正液测 得的结果比较取得结果的方法。试剂与样本反应之前的吸光度在某一定的水 平，开始反后，在主波长下出现一个最大的吸光度，得到一个较明显的吸光 度的落差，所以通过标准品吸光度变化值可以限定其它样本的浓度。终点 法中的反应时间是指开始反应后，试剂与反应物反应到达一定的稳定点，试 剂与反应物不再反应，吸光度不再随时间的变化而发生改变，既到达了反应 平衡。其间所要的时间就是反应时间。在反应时间进程曲线上为与x轴平行 线区段。;（1）延迟区： delay time,lag time； （2）等速区： 斜率相等的线性段；连续检测法在此区读数 （3）过渡区： 两点固定时间法，在此在此区读数 （4）平衡区： 终点法在此区读数;典型的全自动自动生化分析仪基本结构 ;;;;;;; 生化分析仪主要操作程序 仪器运行前，主要进行仪器的基本设置： l．试验项目设置对试验名称、编码，试验组合(Profile)、 试验轮次(Round)，必要时包括试验顺序等设置。 2．各试验的参数设置包括试验间比值、结果核对等参数 的设定。 3．剂设置根据有关试验参数，设置各试验的试剂位、试 剂瓶规格，必要时设定试剂批号、失效期等。 4．校准品设置对校准品的位置、浓度和数量等进行设 置。 5．质控设置 根据质控要求。设置质控物个数，质控规 则，质控项目及相应质控参数等。 6．样品管设置 包括样品管类型，残留液高度（死体 积），识别方式等设置。 7．其他设置对数据传输方式、结果报告格式、复查方式 及复查标准等设置。 ;常规操作程序：  开机(预热、保养)-设置开始条件(日期时间索引、轮次、样品起始号等)-根据需要，申请校准、质控和病人测定项目(包括架号、杯号或顺序号。测定中可继续申请)_装载校准品、质控物和病人标本-装载试剂-核对仪器起始状态（未应用条码系统，采用顺序识别样品时，尤其要核对测定起始编号是否与样品架号和申请号相符）-定标和质控测定-检查定标和质控结果-病人标本测定-测定过程监控（试剂检查，观察分析结果，编辑校正）-数据传递（打印报告，向检验管理系统传输，包括工作量统计、财务统计、病人情况追踪、质控分析等)。测定后保养。 ;测定结果检查分析： 1．各种警示符号的含义与作用在正确设定参数的前提 下，利用各种警示符能提高发现问题和解决问题的效率。 2．运用仪器的相关操作屏(界面) 如：用反应过程监测 (Reaction Monitor)，观察反应时间进程曲线；用校准追踪 (Calibration Trace)回顾分析校准曲线；利用统计(Statistics) 了解不同日期段病人测定均值及数据分析；运用分析数据编 辑(Data Edit)察看和校正测定数据。 3．校准的检查要充分利用仪器设置的功能，监测校准曲 线图形、各校准点吸光度值(不能忽略试剂空白值及空白速 率值)、计算K值等的波动情况，以及与以往的比较。必要 时，应进一步检查反应时间进程曲线。必须结合质控数据来 把握实验条件。 4．病人结果的检