高效毛细管电泳分析羊栖菜多糖对肿瘤机体红细胞电泳淌度的影响研究.pdfVIP

第十一届全国离子色谱学术报告会论文集(浙江杭州.2006.11.28-30) 302 高效毛细管电泳分析羊栖菜多糖 对肿瘤机体红细胞电泳淌度的影响 汲晨锋，王 翀，吴 涛，季宇彬 (哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研发中心，黑龙江哈尔滨，150076) 摘 要：目的 分析羊栖菜多糖对肿瘤机体红细胞电泳淌度的影响。方法 高效毛细管电泳法。实验条件： 磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L, pH 7.4); 毛细管规格: 75 μm × 50 cm; 进样: 3.448 kPa, 10 s; V=20 kV; t=25 ℃。结 果 羊栖菜多糖能降低肿瘤机体红细胞的电泳迁移时间，三个剂量组(高、中、低) 的红细胞电泳淌度与阴性 对照组和正常组相比均有非常显著差异(P0.01) 。结论 羊栖菜多糖能够改变肿瘤机体红细胞表面的电荷 密度，增强红细胞的免疫功能，从而提示高效毛细管电泳法可以作为检测红细胞生理状态和功能的一 种辅助工具。 关键词：高效毛细管电泳；羊栖菜多糖；红细胞；电泳淌度 引言 毛细管电泳（Capillary electrophoresis, CE），又称高效毛细管电泳（HPCE），是近 年来发展最快的分析化学研究领域之一。HPCE 是离子或荷电离子在毛细管中以电场为驱动 力，基于其电泳淌度不同而实现分离的一种新的液相分离技术，迅速发展于 80 年代中后期， 它实际上包含电泳技术和色谱技术及其交叉内容，是分析科学中继高效液相色谱之后的又一 重大进展，它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平，并使细胞分析，乃至单分子分 析成为可能[1,2]。目前已经广泛应用于医药、生物等学科中蛋白质、多肽、核酸等生物大分 子以及无机离子等的分离和分析[3]，高效毛细管电泳与其他经典电泳技术相比，具有高灵敏 [4,5] 度、高分辨率、高速度、进样量小、成本低、应用范围广、易于实现全程自动化等优点 。 细胞表面电荷密度在细胞分化、细胞识别、细胞间黏附、细胞吞噬、正常细胞向肿瘤细 胞的转化及在肿瘤细胞分离、脱落、运动、转移等过程中均起重要作用，也是研究细胞表面 结构和功能的一个重要物理参数[6]。它可以用来推测细胞表面结构，研究细胞与生物大分子 的相互作用、细胞与细胞间的相互作用以及细胞表面的免疫反应等[7~9]。在毛细管电泳中， 被分析物的淌度是它获得分离的内在驱动力[10]。细胞电泳淌度是表征细胞表面电荷的参数之 一[11]。目前，测定肿瘤机体与正常机体红细胞电泳淌度之间的差别国内还未曾报道。本实验 以高效毛细管电泳法测量了羊栖菜多糖作用下肿瘤机体红细胞的电泳淌度，结果表明：高、 中、低 3 个剂量组的红细胞电泳淌度与阴性对照组和正常组相比均有非常显著差异，说明羊 栖菜多糖可以使肿瘤机体红细胞表面电荷密度发生改变，同时显示这种淌度差别有可能作为 了解细胞损伤的一项依据。 1 实验部分 1.1 材料、试剂及仪器 1.1.1 试剂 羊栖菜多糖(SFPS) 由哈尔滨商业大学药物研究所提供；5-FU(上海旭东海普药 业有限公司，批号： ；生理盐水，HCl ，NaOH ，磷酸氢二钾，磷酸二氢钾均为 分析纯，购自天津化学试剂有限公司。 1.1.2 仪器 P/ACE System MDQ 毛细管电泳仪（美国 Beckman 公司），离心机（北京医用 离心机厂）。 1.1.3 实验动物及瘤株 昆明种小鼠，体重20 ±2.0 g ，雌雄各半，由哈尔滨医科大学动物实 验中心提供；S180 （肉瘤）购自黑龙江省肿瘤医院。 1.2 方法 1.2.1 小鼠肿瘤模型的建立 第十一届全国离子色谱学术报告会论文集(浙江杭州.2006.11.28-30) 303 将接种后 7 天生长良好的S180小鼠，