第5章微生物遗传育种2.ppt

第5章 微生物的遗传与育种 遗传学的几个概念 遗传：亲代将自身一整套遗传因子传递给下一代的行为和功能。 变异：生物体的遗传物质结构和数量的改变。 遗传型（genotype）：一个生物体所含有的基因的总和。 表型（phenotype）：一个生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和。 微生物的独特生物学特性： （1）个体的体制极其简单； （2） 营养体一般都是单倍体； （3） 易于在成分简单的组合培养基上大量生长繁殖； （4） 繁殖速度快； （5） 易于积累不同的中间代谢产物或终产物； （6） 菌落形态特征的可见性和多样性； （7） 环境条件对微生物群体中各个个体作用的直接性和均一性； （8） 易于形成营养缺陷型； （9） 存在多种处于进化过程中的原始有性生殖方式； 第一节 遗传变异的物质基础 一、DNA是遗传变异的物质基础 DNA是遗传变异的物质基础的证明： 1944年以后，利用微生物为实验对象进行的三个著名实验： 肺炎球菌的转化试验、噬菌体感染试验、病毒的拆开与重建试验。 三个经典实验： （一）经典转化实验（transformation）： 研究对象：肺炎双球菌 S型菌株：有致病性，菌落表面光滑，有荚膜 R型菌株：无致病性，菌落表面粗糙，无荚膜 （2）细菌培养实验 热死S菌—————不生长 活R 菌—————长出R菌 热死S菌+活R 菌—————长出大量R菌和10-6S菌 （二）噬菌体感染实验 A. D. Hershey和M. Chase， 1952年 （三）植物病毒的重建实验 为了证明核酸是遗传物质，H. Fraenkel-Conrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒（TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。 将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡，就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草并使其患典型症状，而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。 二、DNA的结构与复制 １DNA的一级结构：指碱基序列 ２ DNA的二级结构：主要是B－DNA：双螺旋结构 ３ DNA的三级结构：双螺旋的DNA分子可以进一步盘曲形成更加复杂的结构。 ４DNA的复制：半保留复制 ATTTCG TAAAGC RNA等作为遗传物质的基础： 以RNA作为遗传信息的携带者主要是一些RNA病毒：正链RNA病毒、负链RNA病毒、反转录RNA病毒、双链RNA病毒： 类病毒、卫星RNA 朊病毒:蛋白质 第二节 微生物的基因组结构 基因：一段具有特定功能和结构的连续DNA片段。 基因组：细胞中基因以及非基因的DNA序列的总称，包括结构基因、调控序列以及目前功能未知的DNA序列。 一、原核生物（大肠杆菌）的基因组 紧密缠绕的环状双链DNA分子；遗传信息的连续性；功能相关的结构基因组成操纵子结构；结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝；基因组的重复序列少而短。 二、真核生物（啤酒酵母）的基因组 DNA与组蛋白构成染色体 有间隔子或内含子序列 没有明显的操纵子结构 含有一定数量的重复序列（低度、中度和高度重复） 遗传丰余：较高同源性的DNA重复序列 中心法则： 第三节 质粒 一、原核生物的质粒 质粒定义：是一类小型共价闭合环状核外DNA，能独立于细胞核进行自主复制。可以通过交换掺入细胞核成为附加体；可以从寄主细胞中消除。 近年来也发现了线性双链DNA质粒和RNA质粒 二、几种代表性质粒： 1.F-因子（fertility factor） 致育因子/性因子，62×106Dalton，94.5kb，相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关。 存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中，决定性别。 2.巨大质粒（mega质粒） 为近年来在Rhizobium（根瘤菌属）中发现的一种质粒，分子量为200~300×106Dalton，比一般质粒大几十倍到几百倍，故称巨大质粒，其上有一系列固氮基因。 3.Ti（毒性）质粒（tumoe inducing plasmid） 长200kb，是一种大型质粒。 存在于根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）中。赋予宿主引起许多双子叶植物的根癌的特性。当带有Ti质粒的细菌侵入植物细胞中后，在其细胞中溶解，把细菌的DNA释放至植物细胞中。含有复制子的Ti质粒的小片段与植物细胞中的核染色体发生整合，破坏控制细胞分裂的激素调节系统，从而使它转变成癌细胞。 根癌 4.Col因子（colicinogenic factor）: 产大肠杆菌素因子