RA患者中医体质分析、外周血HLADR4、PADI4、STAT4基因mRNA表达及青藤碱制剂对其干预的研讨.pdfVIP

．K pr 剂对其干预的研究 硕士研究生：吕卓 指导老师：李娟教授 摘 要 研究背景 类风湿关节炎(RheumatoidArthritis，RA)是一种主要以关节关节滑膜 炎症和关节外病变为表现的系统性自身免疫性疾病，当累及关节软骨和骨质时， 逐渐形成关节畸形和强直，导致关节功能丧失。在我国的患病率约为O．4％。 RA的发病机制尚不明确，目前认为RA由多种因素联合介导的自身免疫病， 环境和遗传等因素共同发挥作用。与RA相关的白细胞抗原(humanleukocyte 结合方面起着重要作用，主要功能是与抗原结合将递呈质T细胞。当受到外界刺 激或发生自身改变时，HLA的抗原决定簇发生了改变，借助共同表位和基因剂量 效应，使具有HLA成为免疫活化的靶点，产生T细胞激活及一系列免疫介质如细 胞因子的释放，导致RA免疫性炎症发生，最终导致滑膜、软骨及骨质的破坏。 HLA—DR4FH性的患者更容易发展为侵蚀性病变，预后不好，药物疗效差。RA患者 体内存在有多种对瓜氨酸化多肽特异的抗体，瓜氨酸化在RA发病中有很强的特 deiminasePADI)所编 异性，肽基精氨酸脱亚氨酶(peptidylargininetype 码的酶具有对mRNA翻译后蛋白进行瓜氨酸化修饰，可以催化抗原蛋白多肽进行 瓜氨酸化反应，使蛋白中的精氨酸残基转化为瓜氨酸残基，并通过形成瓜氨酸 肽打破机体的免疫耐受而诱发自身免疫反应的发生。2003至今有多项研究显示 中文摘要 PADl4基因多态性与RA有很强的相关性。T细胞活化在RA发病中起重要作用， CD4+T细胞受不同抗原的刺激分化为不同效应亚群，此过程受调节性转录因子的 transducerand 调控，转录因子起关键作用。信号转导与转录激活因子4(signal activatoroftranscription4，STAT4)被认为是调节Thl细胞分化的关键的 氧核糖核酸(DNA)转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸(RNA)，与 遗传性疾病的发生与表达密切相关。探讨RA患者体内易感基因的表达水平对RA 发病及疾病进展有重要意义。 RA属于祖国传统医学“痹病范畴，因人体遭受风、寒、湿、热之邪的侵 袭，气血为病邪阴闭而引起的疾病。以筋骨、肌肉、关节酸痛、麻木、重着、 屈伸不利和关节肿大、灼热等为临床主要表现。其主要病机是气血痹阻不通， 筋脉关节失于濡养，以祛风、除湿、舒筋活络为治疗大法。中医药治疗RA历史 悠久，疗效确切，且不良反应相对较轻，目前得多越来越关注，以期达到缓解症 状和提高整体生存质量的目的。清风藤用于治疗关节炎己经有上千年历史。其 主要有效成分为青藤碱，现代药理研究显示，青藤碱具有良好的抗炎和抗风湿 的作用。清风痛胶囊(青藤碱制剂)具有祛风化湿、温经散寒、活血通络的功 效，既往药理及临床研究显示对急、慢性炎症具有良好的抗炎镇痛效果。研究 助于了进一步探讨研究青藤碱制剂对RA的作用和机理。 中医学认为体质是个体在先天遗传和后天获得的基础上表现出的形态结 构、生理机能和心理状态方面综合的、相对稳定的特质，是制约和影响疾病发 生发展变化的基本因素之一，并与疾病的发展过程、预后密切相关。RA发病存 在区域差异性，临床表现存在个体差异性，有必要对RA及其相关基因表达水平 与中医体质的关系进行深入研究，而目前这方面研究较少。 同时定量检测多种基因表达水平依靠传统检测手段无法实现。Q(；P技术 Il 硕士学位论文 xMAP (QuantiGenePlex)结合了b-DNA(BranchedDNA)信号放大与Luminex 液相芯片(1iquidchip)平台，其优势是可直接从全血样本中检测mRNA表达， 无需对进行RNA提纯、反转录、PCR扩增，可以同时对极少量样本中的3至36 个基因进行高通量定