第十章 吸光光度法S.pptVIP

第十章 吸光光度法 一、吸光光度法 1、光的基本性质——电磁波 2、吸收光谱产生的原理 * 吸收光谱分为：原子吸收光谱和分子吸收光谱。是因物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生的。 * 原子吸收光谱 Atomic absorption spectrum 由原子外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的，为线状光谱。 线状光谱 - Line spectrum * 分子吸收光谱 -带状光谱 molecular absorption spectrum →由电子能级跃迁而产生吸收光谱[能量差在1~20(eV)]，为紫外及可见分光光度法。 UV/Vis Spectrophotometry →由分子振动能级(能量差约0.05~l eV)和转动能级(能量差小于0.05 eV)的跃迁而产生的吸收光谱，为红外吸收光谱。用于分子结构的研究。 Infrared Spectrophotometry →带状光谱 Band spectrum 3、可见光区中光的互补原理 单色光：具同一波长的光。 复合光：由不同波长组成的光。如白光。 紫外光：波长200~400 nm。 可见光：人眼能感觉到的光，波长在400~750nm。它是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种色光按一定比例混合而成的。 光的互补原理：按一定比例混合，得到白光。混合前的这两种色光称为互补色光。 4、物质对光的选择性吸收 （1）机理：分子外层价电子的跃迁引起。 （2）物质呈现颜色与光吸收的关系： 物质的颜色是因物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生的。 5、吸收光谱：以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图。 * 最大吸收波长：光吸收程度最大处的波长，用λmax表示。 * 吸光度（absorbance） 在可见光区，KMnO4溶液 对波长525 nm附近绿色光 的吸收最强，而对紫色和 红色的吸收很弱。λmax= 525 nm。浓度不同时， 光吸收曲线形状相同， λmax不变，吸光度不同。 二、 光吸收的基本定律 1、 朗伯-比尔定律 （Lambert-Beer law） 当一束平行单色光通过任何均匀、非散射的固体、液体或气体介质时，一部分被吸收，一部分透过介质，一部分被器皿的表面反射。如图6-3所示，设人射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透过光强度为It，反射光强度为Ir。 在吸光光度分析法中，试液和空白溶液分别置于同样质料及厚度的吸收池中，然后让强度为I’0的单色光分别通过这两个吸收池，再测量其透过光的强度。此时反射光强度基本上是不变的，且其影响可以相互抵消。 透射比或透光度 （Transmittance） 透过光强度It与人射光强度Io之比称为透射比或透光度，用T表示溶液的透射比愈大，表示它对光的吸收愈小;相反，透射比愈小，表示它对光的吸收愈大。 朗伯(Lambert J H)和比尔(Beer A)分别于1760和1852年研究了光的吸收与溶液层的厚度及溶液浓度的定量关系，二者结合称为朗伯-比尔定律，也称为光的吸收定律。 当一束强度为I0的平行单色光垂直照射到均匀非散射的长度为b的液层、浓度为c的溶液时，由于溶液中吸光质点(分子或离子)的吸收，通过溶液后光的强度减弱为I： 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光垂直照射到均匀非散射的含有吸光物质的溶液后，溶液的吸光度与吸光物质的浓度及吸收层厚度成正比。 这是进行定量分析的理论基础。 比例常数K与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关。 （3）吸光度的加和性 含有多种吸光物质的溶液，由于各吸光物质对某一波长的单色光均有吸收作用，若各吸光物质的吸光质点之间相互不发生化学反应，当某一波长的单色光通过这样一种含有多种吸光物质的溶液时，溶液的总吸光度应等于各吸光物质的吸光度之和。这一规律称吸光度的加和性。 A总=A1+A2+… 2、K的讨论 Ⅰ吸收系数a 当浓度c用g·L-1，液层厚度b用cm为单位表示，则K用另一符号a来表示。 a称为吸收系数，单位为L·g-l·cm-1，它表示质量浓度为l g·L-1，液层厚度为lcm时溶液的吸光度。 Ⅱ摩尔吸收系数molar absorptivity 当浓度c用mol·L-1，液层厚度b用cm为单位表示，则K用另一符号κ来表示。κ称为摩尔吸收系数，单位为L·mol-l·cm-1，它表示物质的量浓度为l mol·L-1，液层厚度为lcm时溶液的吸光度。最大吸收处的摩尔吸收系数κmax Ⅲ桑德尔(Sandell)灵敏度S S是指当仪器的检测极限A=0.001时，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的