第四章 核酸-2016.pptVIP

＊ tRNA约占全部RNA的15% ＊分子量较小 ＊ tRNA是细胞内分子量最小的一类核酸，由70～120核 　苷酸构成 ＊各种tRNA无论在一级结构上，还是在二、三级结构上 　均有一些共同特点 ＊tRNA中含有10%～20%的稀有碱基(rare bases) (一)转运RNA(tRNA) ?tRNA(transfer RNA)是蛋白质合成中的接合器分子 ? tRNA分子有100多种，各可携带一种（转运）氨基酸， 　将其转运到核蛋白体上，供蛋白质合成使用 ?每一种氨基酸都有起相应的一种或几种tRNA ? tRNA在反转录及其它代谢调节中也起作用 Base pairing can occur in RNA as it does in DNA, but unlike DNA, ther is no single, regular structure formed by RNA. RNA sometimes forms double-stranded duplexes, but more often, single RNA chains fold back upon themselves and use base pairing to produce unique and complex structures like the one above. The structure arises from the formation of intramolecular base pairs within a single-stranded RNA molecule. (二)信使RNA(mRNA)与不均一核RNA(hnRNA) 遗传信息从DNA分子抄录到RNA分子中的过程称为转录(transcription)。在真核生物中，最初转录生成的RNA称为不均一核RNA(heterogeneous nuclear RNA,hnRNA)，然而在细胞浆中起作用，作为蛋白质的氨基酸序列合成模板的是mRNA(messenger RNA)。hnRNA是mRNA的未成熟前体。 (三)核蛋白体RNA(rRNA) 核蛋白体RNA(ribosomal RNA)是细胞内含量最多的RNA，约占RNA总量的80%以上，是蛋白质合成机器。核糖体蛋白(ribosmal protein,rp)有数十种，大多是分子量不大的多肽类。 DNA和 RNA的 结构 比较 生物化学 生物化学 RNA is generally single stranded instead of double stranded. Above you see that Uracil substitutes for Thymine in RNA and that the sugars in the RNA have a hydroxyl group which is lacking in DNA. 一、核酸的紫外吸收 二、核酸的沉降特性 三、凝胶电泳 四、核酸的变性、复性与杂交 五、DNA的固相合成 六、DNA的限制酶图谱 第四节 核酸的化学性质和常用的研究方法 一、核酸的紫外吸收 在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，一般在260nm左右有最大吸收峰，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。 以A260/A280进行定性、定量 DNA和RNA溶液中加入溴化乙锭（EB），在紫外下发出荧光 二、核酸的沉降特性 溶液中的核酸分子在引力场中可以下沉，不同构象的核酸、蛋白质及其它杂质在超离心机的强大引力场中沉降的速率有很大差异，因此可以用超离心法纯化核酸，或将不同构象的核酸进行分离，也可以测定核酸的沉降常数与分子量。 应用不同介质组成密度梯度超离心分离核酸的效果较好。RNA：蔗糖梯度；DNA：氯化铯梯度。 生物化学 三、凝胶电泳 ?琼脂糖（agarose）凝胶电泳 电泳的迁移率决定于：1）核酸分子大小（与分子量对数成反比）；2）胶浓度（成反比，常用1%的胶分离DNA）；3）DNA的构象（超螺旋DNA快于线型DNA，开环的最慢）；4）电流（适当的电压差时与电流大小成正比，小于5V/cm）；5）碱基组成；6）温度。 ?聚丙烯酰胺（po