甲霜灵农药中甲霜灵对映体的分离测定研究.pdf

首届中国中西部地区色谱学术交流会 2006年8月 甲霜灵农药中甲霜灵对映体的分离测定 明永飞1’2，张红丽1，赵亮1，师彦平1，李永民卜 1(中科院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室，兰州730000)2(中科院研究所生院，北京110009) 麓要-利用键合型纤维素一(3，5一二甲基苯基氨基甲酸酯)固定相高效液相色谱涪直接折分了甲霜灵对映异构体，通过考察漉动相中 的改性剂(醇类、四氢呋喃、三氯甲烷)，流动相的流逮对手性拆分的影响，优化了色谱分离条件．结果表明．键合型手性固定相对甲霜 灵有很好的拆分效果，在150咖的色谱桂上，使用正己烷，异丙醇(80／20，v／v)流动相，甲霜灵可以得到良好的分离．在优化的条件下， 建立了键合墅手性柱上分离分祈甲霜灵的方法，对其线性范围．拴测隈、熏现性以及回收率进行了考察，结果表明该方法简单．灵敏．准 确．可蠢． 关键词：键龠。；手性固定相：手性拆分；测定：甲霜灵 ·。 随着现代药物研究的发展，提供高效低毒的光学纯药物已经成为药物研究的重要方向。由于手 性药物对映体在药理学和毒理学上的不同，分别对手性药物不同的对映体进行药理和毒理学的研究 成为药物研发过程中必不可少的重要组成部分u矗1，因此对有关手性药物进行手性分离分析具有十分 重要的意义。目前，许多色谱和光谱法已经被用于药物对映体的分析，在这些色谱分析法中，高效 液相色谱固定相法已经得到广泛的应用陟10。。 甲霜灵是一种优良的内吸性杀菌剂(化学结构见图1)，目前市场需求量巨大，远远超过了其它 类型的杀菌剂。现在市售的甲霜灵大多是它的外消旋体，而研究表明，甲霜灵的左旋体具有更高更 强的杀菌作用，右旋体相对左旋体来说杀菌性并不明显u¨。有关甲霜灵对映体的高效液相色谱法的 分离已有报道n弘H1，但是，在这些相关的分离研究中，采用的固定相均为涂敷型的纤维素或淀粉手 性固定相，但是，涂敷型的手性柱在使用四氢呋喃、三氯甲烷，丙酮等一些有机溶剂作为流动相时， 会使纤维素衍生物溶胀和溶解，破坏了它的空间结构而失去手性识别能力u引，这大大限制了该类手 性柱的使用，而键合型则克服了这一缺点。迄今为止，有关甲霜灵在键合型纤维素手性固定相上的 分离分析还未见报道。 宁H3 ／pH—coocH3 ＼co—g兰一。一cH3 图l甲霜灵的化学结构式 本文利用键合型纤维素一(3，5一二甲基苯基氨基甲酸酯)固定相液相色谱法对甲霜灵在键合型手 性固定相的拆分进行了系统研究。考察了异丙醇的浓度、不同的醇类改性剂、四氢呋喃以及三氯甲 烷对甲霜灵手性分离的影响。优化了甲霜灵的分离条件，建立了甲霜灵农药中甲霜灵对映体的分离 分析方法并用于甲霜灵农药中甲霜灵对映体含量的测定。 1实验部分 1．1试剂与仪器 正己烷(天津化学试剂二厂)甲霜灵外消旋体(浙江禾木化学试剂公司)；四氢呋喃、三氯甲 烷均为国产分析纯试剂。液相色谱系统由515 本文系国家自然科学基金(No和中国科学院“西部之光”资助项目 145 首届中因中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 p 1．2色谱条件 ‘ ll 正己烷／异丙醇(80／20)为流动相，进样20 实现了甲霜灵对映体的手性拆分。色谱图见图2。 1．3色谱计算 和Wct／2，z分别为第一个洗脱峰和第二个洗脱峰之半峰宽。 1．4样品的配制 ． 准确称取甲霜灵对映体20mg，利用流动相溶解于10mL的容量瓶中，定容，得到单一对映体的 浓度为1mg／mL的原始标准溶液，稀释得到其它浓度的标准液。