癌变细胞傅里叶红外光谱FTIR测定方法研讨.pdf

26 癌变细胞傅里叶红外光谱(FTIR)测定方法研究 I 癌变细胞傅里叶红外光谱(FTR)测定方法研究 韩伟冯瑞珍 (河北省分析测试研究中G 石家庄050018) E--maih．h．．．a．．．．n．．．w．．．．．e．．．i．．@．．．．．h．．．e．．．b．．．．u．．．s．．．t．．．．．e．．．n．．．．t．．．．．c．—n— 摘要：提出了一种测定癌变细胞的新方法，利用高分辩傅里叶变换红外光谱(FTIR)，对正常人的细 胞和干余名宫颈癌患者的细胞进行了对比研究，还就妇女普检中的50例样品与中国肿癌研究院病理结果 的对照。初步得出该FTIR法能在分子水平上揭示出癌变细胞与正常细胞的明显差别，并且通过谱图解析。 可直接阐明引起谱图变化的主要原因、细胞癌变的可能机理。从而对病程进行预测，为肿瘤疾病的早期诊 断展现了良好的前景。 关键词傅里叶变换红外光谱，宫颈癌。癌变细胞 傅里叶变换红外谱(FTIR)及其相关技术的迅速发展，不仅越来越广泛地用于蛋白质、核酸等大生物 分子结构研究上，而且已开始更用来深入地研究细胞和组织等更加复杂的体系。组织是由细胞组成的，而 细胞中最基本的聚合物是核酸(DNA、RNA)蛋白质、双层磷脂膜。核酸的单体是核苷酸，蛋白质是由氨 基酸组成，糖蛋白系糖和多肽的结合物，膜的单位是脂类有机分子，这些聚合物在细胞中有机地融为一体。 细胞的红外光谱就是由上述聚合物分子的振动光谱组成。它反映了核酸、蛋白质、糖蛋白和生物膜等分子 在细胞内的含量、构型、构象及其所发生的变化。 目前在癌症临床常规诊断过程中，主要是有经验的医生、病理学家、组织学家等进行病理解剖及组织 细胞学诊断。组织的固定、染色以及显微镜下的观察与分析，过程繁琐，且常有很大的主观性，往往还出 现假阴性和假阳性的结果，如果采用傅里叶变换红外光谱法进行癌症的鉴别与诊断，不仅简便、快速、花 钱少，而且是在分子结构层次上作出的判断，其准确率高。 我们利用FTIR高分辨手段，对千余名正常人的组织、细胞和肿瘤患者的细胞进行了对比研究，初步 得出FTIR法能在分子水平上揭示出肿瘤与正常细胞的差别，并且还通过谱图解析，可直接阐明引起谱图 变化的主要原因，细胞癌变的可能机理及病程进展各期(正常一微小的病理变化一恶性期)，为肿瘤疾病 的早期诊断展现了良好的前景 1 实验部分 1．1仪器与试样 仪器：美国NicoletsDx—B傅里叶变换红外光谱仪； Nicolet 650型傅里叶变换红外光谱仪。试样：中国医科院肿瘤研究院提供 1．2实验方法 由于各种肿瘤的性质和组织形态的不同，要获取有的红外光谱，需要采取不同的样品预处理步骤 与制样技术。对于宫颈癌，我们使用取样拭子采样，将拭子脱落的宫颈细胞，然后用液氮将其冷冻成 上述方法处理后的样品，转移至自制的特殊附件上，放入傅里叶变换红外光谱仪的光路中进行光谱测 定。 第二期 光谱仪器与分析 2结果与讨论 2．1 FTIR法测定结果是以谱图和数字表示，比较形象、直观，等级划分较多、较细，易于比较。 2．2 FTIR法所使用的仪器为傅里叶红外光谱仪，其灵敏度较高，只要细胞结构有微小变化，便可从谱图 上显示出来，可用于癌症的早期检查。又因方法操作简便、快速、成本费用较低，便于方法推广。 2．3肿瘤院的检测方法，主要描述细胞形态特征，是形貌观察，而FTIR法是测定细胞结构，从分了冰平 阐明问题，若这两种方法能够结合应用，优势互补，定能给医生提供更多的诊断依据和信息，大大提 高癌症判断的准确率和医治水平。 2．4磷酸二酯基因伸缩振动谱带 基本为一单峰位于1240 与正常组织相比，显著增加，这是因为在癌变过程中，细胞内的核酸分子中P02基团大部分形成氢键 导致频率下降(由1240 cm4降至1220 cm。)，强度增加，这一结论通过应用高压样品池测定得到证实。 压力增强，氢键结合力增强，基团振动频率降低，而吸收强度大为增强。 2．5糖原(Glycogen)红外吸收谱带