硅橡胶膜光生物反应器培养海带配子体细胞的研讨.pdfVIP

撮建In。 第三届海洋生物高技术抡坛 2005．08．19—23 硅橡胶膜光生物反应器培养海带配子体细胞的研究+ 陈思晔 张宝红齐瀚实+ (上海交通大学药学院上海200030) d～， 摘要：本文首次利用硅橡胶膜光生物反应器培养海带配子体细胞，比生长速率达0．0772 最大生物量为576．1 mgDCWL一，生物量扩增倍数达14．4倍。无细胞培养液中DO随时间的 Blue染色法以及 变化证明了膜对气体分子的通透能力。通过测定细胞的光合速率、Trypan 对细胞形态作镜检，验证了膜供气培养方式较鼓泡培养法对细胞产生的剪切力小。硅橡胶膜 光生物反应器适合培养易受剪切力影响的大型海藻配子体细胞。 关键词：膜生物反应器，硅橡胶膜，气体通透性，剪切力，海带配子体细胞 刖吾 许多大型海藻体内含有多种具有潜在药用价值的生物活性物质…，但大多数化合物结构 复杂‘21、含量甚微‘31，不宜采用人工合成或化学提取的方法获得。光生物反应器培养大型海 藻细胞或组织的方法能在人为可控条件下收获生物量和生物活性物质，并成为未来大规模工 业生产的主要和有效途径【4】。目前该领域的光生物反应器种类主要有搅拌式、鼓泡式和气升 式，反应体系中通入的气泡会对细胞产生一定的剪切损伤【5J。 膜生物反应器是一类集选择性分离和生物反应于一体的非搅动式反应器，可用于动植物 rubber 细胞培养【6】。目前，聚硅氧烷材料制成的硅橡胶管状膜(silicone tube)应用很广，这种均相致密无孔膜对气体分子有很好的通透性【7l，而且无泡的表面供气 培养方式(以下称膜供气培养)避免了气泡对细胞产生的损伤。 本文首次利用硅橡胶膜生物反应器以膜供气的方式培养大型海藻的配子体细胞，研究并 比较了海带配子体细胞在膜供气和鼓泡式光生物反应器中的生长情况，为大型海藻细胞培养 方式的选择提供了一定的借鉴和启示。 1材料和方法 1．1藻种、培养基及保藏方式 海带(Laminariajaponica)雌性配子体克隆系，由中科院海洋所提供。 L．。)：0．25，0．000125，O．000125， 限制性营养元素(KN03，KH2P04)，它们的最终浓度分别为(mg 60，5，培养基用0．221xrn滤膜抽滤。 sJ和16h 藻种保存于10±1℃的光照培养箱中，光照强度和光周期分别设定为20肛m-1 +863计划(2002AA629070)资助项目。 +通讯作者，Email：biotech@sjtu．edu．cn 316 疆毽|门 第三届毒洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 ／8h。 1．2培养装置和培养条件 mm， 鼓泡式生物反应器(880600—0580，KONTES)，内径和高度分别为48mm和500 mL／min。 ]二作体积是600mL，反应器自带的气体分布器整合在反应器底部，通气速率为100 mL， 自行设计的硅橡胶膜生物反应器，内径和高度分别为9cm和12cm，工作体积是600 反应器顶部下方安装不锈钢架，其上紧密缠绕生物相容性聚硅氧烷管(Siliconetube)，管内