生物化学与分子生物学（南方医科大学）8.癌基因.pptVIP

目前认为广义的“癌基因”应当是：凡能编码生长因子、生长因子受体、细胞内生长信息传递分子，及与生长有关的转录调节因子的基因均应归属癌基因的范畴。 （一）获得启动子与增强子 （二）基因易位 （三）原癌基因扩增 （四）点突变 出现新的表达产物 出现过量的正常表达产物 出现异常、截短的表达产物 癌基因被激活的结果 三、癌基因活化的机制 （一）获得启动子与增强子 逆转录病毒感染细胞后，病毒基因组所携带的长末端重复序列（LTR内含较强的启动子和增强子）插入到细胞原癌基因附近或内部, 启动下游邻近基因的转录和影响附近结构基因的转录水平，使原癌基因过度表达或由不表达变为表达，从而导致细胞发生癌变。 鸡白细胞增生病毒 淋巴瘤 原癌基因的插入激活 （二）染色体易位 在染色体易位的过程中发生了某些基因的易位和重排，使原来无活性的原癌基因移至强的启动子或增强子附近而被活化，原癌基因表达增强，导致肿瘤的发生。 （三）原癌基因扩增 细胞周期中DNA复制数次，导致原癌基因拷贝数量的增加。 （四）点突变 原癌基因在射线或化学致癌剂作用下，发生单个碱基的替换——点突变。 常见的为ras原癌基因的点突变。 ras原癌基因点突变后导致其GTPase活性下降，不能将其结合的GTP迅速水解，从而使其持续保持激活状态。 GDP GDP GTP GTP Pi 无活性的Ras蛋白 有活性的Ras蛋白 输入的信号刺激GDP-GTP交换 内源性GTP酶活性 输出信号 突变的Ras癌基因蛋白质被锁定在激活状态 作用于细胞膜上的受体系统或直接被传递至细胞内，通过蛋白激酶活化转录因子，引发基因的转录激活。 四、原癌基因的产物与功能 （一）细胞外生长因子 （二）跨膜的生长因子受体： 接受细胞外的生长信号并将其传入胞内。受体的胞质结构区具有特异的蛋白激酶活性，通过磷酸化作用使其结构发生改变，增加激酶对底物的活性，促进生长信号在胞内的传递。 （三）细胞内信号传导体 原癌基因的产物作为胞内信息传递体系成员，或者通过影响第二信使作用，将接受到的信号由胞内传至核内，促进细胞生长。 （四）核内转录因子 某些癌基因表达蛋白定位于细胞核内，与靶基因的顺式调控元件相结合直接调节靶基因的转录活性。 抑癌基因Anti-oncogenes 第二节 抑癌基因(cancer suppressive gene, anti-oncegene) 一、抑癌基因的基本概念 抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。 细胞杂交试验 正常细胞 肿瘤细胞 非肿瘤型杂交细胞 杂交融合 正常细胞 失去某些基因 肿瘤细胞 二、常见的抑癌基因 （一）视网膜母细胞瘤基因 （Rb基因） 基因结构：200kb，2.7kb mRNA 分子量为105kDa的蛋白（P105-Rb）。 P105-Rb功能：参与调节E2F等多种转录因子来控制细胞周期，影响细胞增殖和分化。 P105-Rb活性调节：高磷酸化无活性型和非或低磷酸化活性型。 三、抑癌基因的作用机制 低磷酸化型的P105Rb可与转录因子E2F结合形成复合物，从而阻止E2F启动某些在细胞增殖过程中起主要作用的基因的转录。 高磷酸化型的P105Rb则可促使其与E2F转录因子分离，从而使其呈现活性。 Rb基因失活后，其表达产物不能与E2F形成复合物，E2F处于持续激活状态，导致细胞增殖。 G0 G1期 Rb蛋白 E-2F S期 E-2F DNA mRNA DNA P Rb蛋白 P105-Rb活性调节 P53 P53蛋白 复制因子A P21蛋白 细胞停滞于G1期 细胞调亡 酸性区 核心区 碱性区 P53蛋白 DNA损伤 P21基因 P53蛋白 成功修复 修复失败 解链酶 抑 制 P53蛋白 P53蛋白的生物学功能有： ① 转录调节及抑制细胞生长的作用： P53蛋白促进WAF1/CIP1基因表达产生一种分子量为21kD的蛋白质（p21WAF1/CIP1），诱导细胞生长停滞于G1期。 ② 抑制DNA复制： P53蛋白可与复制蛋白A(RPA) 结合，而RPA与解链状态的DNA单链的结合可能是DNA复制的起始步骤。 P53蛋白与RPA结合后可抑制RPA与单链DNA的结合，从而抑制了RPA与DNA复制起始点的结合，阻止细胞进入S期。 P53蛋白还可通过抑制解链酶的活性，以抑制DNA复制。 ③ 参与程序性细胞凋亡： P53 蛋白使损伤细胞停留在G1期，以便使DNA损伤修复后再进入细胞周期。若损伤不能修复，则启动细胞进入程序性凋亡（细胞自杀）。 P53基因突变不仅失去野生型p53抑制肿瘤增殖的作用，而且突变本身又使该基因具备癌基因功能。 突变的P53蛋白与野生型P53蛋白相结合，形成的这种寡聚蛋白不能结合DNA，使得一些癌变基因转录失