桉树ESTCAPS标记的开发及其用于遗传图谱构建的研究.pdf

福矬农林人学2006届戗h生论土 桉树EST-CAPS标记的开发及其用于遗传图谱构建的研究 摘要 遗传图谱构建是当前植物遗传研究的热点，但林术遗传图谱构建中存在密度较低、共显性标 记不多、基于功能基因的标记缺乏等问题，如何开发共显性的、基于功能基因的分子标记并 用于林木遗传图谱构建是急需解决的问题。按树在全球范围内是重要的造林树种，也是林木 遗传研究的模式树种，其遗传图谱构建具有重要的理论意义和应用价值。 利用从GcneBank下载的细叶桉54条EST序列，进行了引物设计和PCR扩增条件优化，有 35对引物能成功进行PCR扩增。利用30种限制性内切酶对可成功PCR扩增的35个EST序 列在尾叶桉×细叶按F。作图谱系的多态性进行了筛选，分析了EST-CAPS标记的分离方式， 并将多态性的EST-CAPS标记整台到尾叶桉和细叶桉的RAPD遗传图谱上。 分离方式研究中，有7个EST序列可月；f合适的限制性内切酶酶切并在作图谱系中产生多态性， 种可靠的遗传标记，可用于桉属树种遗传图谱构建和相关研究。 在分离方式研究的基础上进行了遗传图谱构建的研究，运用作图软件Mapmaker3．0将 群．基于RAPD．CAPS的尾叶桉新图谱包含24个连锁群．新增连锁群1个，总遗传图距 1546．IcM．标记问的平均距离为10．8cM。另有1个偏分离标记未能连锁到任何连锁群上。整 合4个EST-CAPS标记后的细叶桉新图谱总遗传图距1122．5cM，分布于23个连锁群上．标 记间的平均距离为10．2eM。4个标记分布于第6、7、8和第10连锁群上。基于RAPDcAPS 的尾叶桉和细叶桉新图谱，遗传总图距分别增加了41．5cM和87cM：各自疆盖原来估计基因 组全长的97．5％和74．5％。因此，EST-CAPS标记技术可有效用于遗传图谱的构建，可以为桉 树及其它树种提供研究参考。 关键词：EST-CAPS：分离方式；桉属；遗传连锁图谱 主题词：桉属；EST-CAPS；遗传连锁图谱 桉树Es■CAPS标记的开发驶其用于遗传幽谱构建的础究 of EST-CAPSmarkersandtheir to Development applicationlinkagemap constructionin Eucalyptus Abstract Some stillexistinforesttree aslow small problems linkagemapconstruction，suchdensity,a numberofco-dominantmarkers few used，and markers gene-basedincluded，thoughlinkage hasbeenahot in studies．Solutiontothese was mapping topicplantgenetics problemsvery inbotlltheoreticaland terms a crucialrolein important applicationalEucalyptsplays global andserveasamodelinforesttree constructionbe forestry genetics；theirlinkagemap would valuableanduseful． considerably