卵类糖蛋白手性柱拆分钙离子拮抗剂尼卡地平对映体.pdfVIP

第33 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第12 期 2005 年12 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1779 ～ 1782 卵类糖蛋白手性柱拆分钙离子拮抗剂尼卡地平对映体 傅 强 贺浪冲# （西安交通大学药学系，西安7 10061） 摘 要 研究了在卵类糖蛋白（OGCHI ）手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素，建立 了尼卡地平对映体的拆分方法。氨丙基硅胶在0 . 2 mol/ L 磷酸钠缓冲液（pH 6. 6 ）中与OGCHI 反应，制备的 固定相装填于10 cm 不锈钢柱中，用高效液相色谱法拆分尼卡地平对映体。优化的色谱条件为：0 . 05 mol/ L 磷酸钠缓冲液（pH 5. 5 ）- 甲醇（65 : 35 ），流速0 . 2 mL/ min ，紫外检测波长236 nm ，柱温：25℃ 。在此条件下，尼 卡地平对映体可得到良好分离。通过改变有机改性剂的种类和比例、流动相的pH 值、缓冲溶液的浓度以及 流速等色谱条件，确定了影响尼卡地平对映体拆分的主要因素。 关键词 尼卡地平，手性分离，卵类糖蛋白，高效液相色谱 1 引 言 药物分子的对称性与药物作用密切相关，手性药物的分离测定对理解其药理和毒理作用、确定药动 ［1］ 学参数、合理用药以及质量控制具有重要意义 。尼卡地平（nicardipine ）是一种选择性地阻滞电压依 赖性钙通道，抑制Ca2 + 内流的药物，属于强效力、水溶性的第二代二氢吡啶类钙拮抗剂（dihydropyridine calcium antagonists ，DHPs ）。尼卡地平结构中二氢吡啶环的4 位为不对称碳原子，故具有两个对映体。 ［2 ］ 这两个异构体在药理活性上存在着明显的差异 ，但目前临床仍使用其消旋体。与大多数DHPs 不同， 尼卡地平含有脂烃胺基，显碱性，临床常用其盐酸盐。DHPs 对映体分离已引起人们广泛关注。报道 的手性固定相包括大环类抗生素类如万古霉素［3 ］，多糖及其衍生物类如纤维素类手性固定相Chiralcel ［4 ］ ［5 ］ 系列 、蛋白质类手性固定相如 -酸性糖蛋白（ -AGP ）和卵类粘蛋白类（OVM ） 等。其中，OVM 手 α1 α1 性固定相对DHPs 具有更强的亲和力，而且具有用亲水性溶剂作为流动相的优点，对于生物样品的分析 ［6 ］ 十分有利 。近年来，OVM 得到进一步的分离，在目前常用的OVM 制备中被视为杂质而除去的卵类糖 蛋白（ovoglycoprotein ，OGCHI ）显示出优良的手性识别能力，尤其适用于含有疏水基团的芳香性化合 ［7 ］ ［8 ］ 物 。Fu 等 研究了中性DHPs 药物尼莫地平等在OGCHI 柱上的色谱行为，本实验对碱性DHPs 药物尼 卡地平对映体的分离进行了研究，建立了尼卡地平对映体在OGCHI 手性柱上的拆分方法。 2 实验部分 2 . 1 仪器、试剂与样品 高效液相色谱仪，包括LC-10AT 型泵、SPD-10A 型紫外-可见检测器等（日本岛津公司）。 Sigma 公司）；盐酸尼卡地平片（市售）；（S ）-（+ ）-和（R ）-（- ）-尼伐地平 尼卡地平对照品（ （Fujisawa Pharmaceutical Co. ）；乙腈（色谱纯，美国Fisher 公司）；配制流动相用的甲醇、无水