我国大麦醇溶蛋白多肤的多态性研究.pdfVIP

遗 传 学报，18(3);252-262,1991 滩ctaGeneticaSinica 我国大麦醇溶蛋白多肤的多态性研究＊ 湛小燕1) 俞志隆 杭（州大学生物系310028) 黄 培 忠 （上海市农科院作物所） 对22个省的大麦农家品种487份和3个近缘野生种的10份材料，应用 SDS,IEF 及双向电泳 (I（EF,SDS）进行了醇溶蛋白多肤多态性的研究，主要结果如下：(1)B醇 溶蛋白多肤多态性十分显著。经 SDS可分出16种带型，归为a,43,Y,co四组，不同的多 肤带型中间也有一些多肤是共有的；(2)S种带型的地理分布表明，具有同种带型的品种分布 于一定的地理区域；各区域品种所具有带型类型的数目虽然不同，但表现出一定的趋向，这种 趋向似与大麦进化和生态区域有关；(3）近缘野生大麦的带型有的与农家品种带型相似，有的 则相异；但一些农家品种的带型在供试近缘野生种中还未找到与之相近的带型；钓（初步讨论 了醇溶蛋白多肤多态性在品种鉴定上的应用和作为栽培大麦生态区域划分辅助手段的可能 性。 关镇词 大麦，醇溶蛋白，多态性，品种鉴别 醇溶蛋白是大麦籽粒的主要贮存蛋白，约占成熟种子总氮的40--60外，按其蛋白质 多肤的分子量、等电点与氨基酸组成分为A,B,C、和D四组OB,9组醇溶蛋白变异广 泛，并可稳定遗传，分另1由第5染色体上的Hor2和Hor1基因编码。研究醇溶蛋白多 肤的多态性，对进一步阐明大麦自然群体的遗传与进化、栽培品种的鉴别，以及改良醇溶 蛋白以提高籽粒营养价值具有理论与实践意义。 这些在国外已有较多报道L3,4,7,“一3,‘I5,1f]O 我国是大麦的重要基因库之一，但对醇溶蛋白多态性的研究还未见报道。本研究目的在 于从电泳带型初步分析我国大麦农家品种与野生近缘种的醇溶蛋白多肤多态性及其与进 化的关系；初步探讨多肤多态性作为品种鉴别和我国大麦生态区划指标的可行性。 材 料 和 方 法 （一）材料 大麦种子来自22个省市，共计农家品种487份，3个近缘野生种的龙换10份，均由 各省市农科院品资室提供。除直接用作分析外，还当年栽种，‘以供观察和重复分析。 二（）方法 1。十二烷基磺酸钠一聚丙烯酸胺凝胶 电泳 (SDS) 参照Shewry`“一81‘和 本文于 1989年7月1日收到。 ＊中国科学院基金资助课题。 1)现在中国水稻研究所谷物化学系工作。 3期 湛小燕等：我国大麦醇溶蛋白多欣的多态性研究 2.53 Dol押 的方法，作适当改进。种子 1粒，提取液含55%-正内醇和2%2-统基乙醉；平板电 泳分离胶浓度13%,pH9.7；浓缩胶浓度5%,pH9.3；电极缓冲液负极PH8.5，正极礴 9.7，含0.1%0SDS。为保证实验结果准确，除严格控制操作条件外，还进行了重复电沐，分 别以品种 Bomi和标准分子量为参比，在每块电泳板上有 1参比条带。 2，等电聚焦凝胶电泳 (IEF) 参照 Shewryt1的方法，并做了适当的改进。盘状 电泳胶浓度5.2务，两性电解质10fo(pH3.5--10.0)，样品溶解液和胶中均含6molfL碌。 3．双向电泳 (IEF,SDS） 参照 Faulks6(1的方法，并做一定的修改。在第 一向电泳结束后，将胶浸入10务三氯醋酸固定 1小时，用重蒸水漂洗4次后将胶放入 SDS处理液，800C,10分钟，接着进行第二向电泳。 结 果 和 分 析 （一）B醉溶蛋白多肚带型的变异 94000 67000