9PCR原理及技术与电泳色谱题库.docVIP

PCR原理及技术题库 一、名词解释 1、PCR: 2、引物： 二、填空题 1、PCR包括一下7种基本成分：____________、 ____________、 _____________、 ____________、二价阳离子、 ____________ 及一价阳离子。 2、除了纯化的DNA外，PCR反应还可以直接以_______为模板。 3、______________是PCR技术实现自动化的关键。 4、在常规PCR反应液中，每种dNTP的浓度一般在__________之间。 5、PCR反应体系中，常用的游离二价阳离子是_______和 _________。 6、双链DNA模板的变性温度由其__________来决定，模板DNA的___________越高，熔解温度也越高。变性时间由模板DNA分子的_______来决定，DNA分子_________，两条链完全分开所需的时间也越长。 7、对于Taq DNA聚合酶，最适温度一般为___________。 8、PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中_______________以及引物延伸和扩增的________。 9、PCR产物短期存放在____________保存，长期储存应置于____________。 10、PCR引物设计的目的是在___________________和________________间取得平衡。 11、在实际工作中，基因扩增试验实验室污染类型包括_________________，________________，__________________，___________________。 三、选择题 1、下列选项中，不属于PCR在基础研究方面的应用的是（ ） A、扩增目的基因 B、检测病原体 C、克隆基因 D、基因组测序 2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ ） A、0.3—1mmol/L B、0.5—1mmol/L C、0.3—2mmol/L D、0.5—2mmol/L 3、多重PCR需要的引物对数为（ ） A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物 4、PCR 是在引物、模板和4种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ ） A、模板 B、引物 C、dNTP D、镁离子 5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增（ ） A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多 C、A、B都可以 D、缓冲液中镁离子含量过高 6、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是（ ） A、640 B、8100 C、600 D、8640 7、对于禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感。（ ） A、M B、N C、Q D、W 四、判断题 1、小片段模板的PCR效率要低于大片段分子。（ ） 2、一般来说，引物越长，对于靶序列的特异性也越高。（ ） 3、高浓度的dNTP对扩增反应有抑制作用。（ ） 四、问答题 1、简述PCR的发展史。 2、简述PCR的原理。 3、PCR的基本反映过程中，为什么退火温度至关重要？ 4、简述PCR的主要应用。 5、资料显示，近十年来，PCR技术成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答： 电泳色谱题库 一、名词解释 1、电泳： 2、毛细管电泳(CE)： 3、电渗流： 4、自由流电泳： 5、毛细管电泳色谱（CEC）： 6、毛细管电泳的电场强度： 7、电泳速度： 8、迁移率： 9、电泳淌度： 10、迁移时间： 11、电渗： 二、填空题 1、电泳过程总，阴离子向__________迁移，阳离子向__________迁移，中性化合物不带电，不发生__________。 2、目前凝胶电泳的的主要介质是_______和__________________。 3、毛细管电泳中，在毛细管中带电粒子受到 ________和 _________两种驱动力。 4、_____________提供了唯一真正的实用性手段来达到放大制备性电泳这样一个目标。 5、毛细管电泳的基本装置包括：____________、电解液槽、_____________、高压电源及_______