金属离子对青霉葡萄糖氧化酶的效应研究.pdfVIP

第 49卷 第 3期 厦门大学学报 (自然科学版) Vo1．49 No．3 2010年 5月 ／ournalofXiamenUniversity(NaturalScience) M ay2010 金属离子对青霉葡萄糖氧化酶的效应研究 张 茜 ，闰 冰 ，康劲翮 ，王 勤 ，石 艳 ，陈清西n (1．厦门大学 生命科学学院，滨海湿地生态系统教育部重点实验室，福建 厦门 361005； 2．厦门大学附属第一医院，福建 厦门361004) 摘要：研究了几种金属离子对青霉(Penicilliumamagasakiense)葡萄糖氧化酶(简称GOD，EC．1．1．3．4)活力的影响． 金属离子对酶活力的影响表明：Na 、K 、Ca 、Pb 、Mnz等对酶活力基本没有影响；A1”、Zn2对酶有一定的激活作 用；Ag 、Hg 、Mg抖、Cdz、Cu 、Co。等对该酶活力有不同程度的抑制作用．其中Ag 、Cu抖、Ha~对酶的抑制作用 较强，随着抑制剂浓度增大，酶活力呈指数下降，导致酶活力下降5O 的抑制浓度为 0．08、10．0和 31．25tlmol／L．进一 步研究了Ag 的抑制动力学 ，结果显示：Ag对酶的抑制作用为竞争性可逆抑制，抑制常数 (K-)为 0．065~mol／L．该研 究对青霉葡萄糖氧化酶的应用具有一定的参考价值． 关键词：葡萄糖氧化酶；青霉；金属离子；抑制机理 中图分类号 ：：TQ925．4 文献标识码：A 文章编号 ：0438—0479(2010)03—0396—04 葡萄糖氧化酶 (简称 GOD，EC．1．1．3．4)能够在 28686)购 自中国工业微生物菌种保藏管理 中心；GOD 有氧气 的条件下专一性催化 D一葡萄糖生成葡萄糖 是由本实验室从青霉菌重制备而获得的电泳纯酶制 酸和过氧化氢[1]．它广泛地分布于动物、植物和微生物 剂；葡萄糖为上海生化试剂厂产 品；辣根过氧化物酶为 体 内，但 由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特 厦门普京生物技术有 限公司产 品；4-氨基安替吡啉为 点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源 ，微生物中的主 BioBasicInc产品；其余化学试剂均为国产分析纯；其 要生产菌株为黑 曲霉和青霉．GOD由于其天然无毒、 它生化试剂均为国药集团化学试剂有限公司生产． 无副作用，自20世纪初被发现 以来 ，已广泛应用于食 1-2 实验方法 品医药 、临床化学、分析化学等许多领域[2]．在食 品工 业 中，用于食品脱氧，改善食 品和饮料的品质 ；同时还 1．2．1 酶蛋白浓度的测定 用于面粉的改 良工艺等方面[3]．在医药工业 中，用于血 酶浓度测定采用 Folin-酚法[6]． 糖 的测定及尿糖、尿酮体的检测 ，可制成糖尿试纸或试 1．2．2 酶活力的测定 剂盒用于临床诊断；还可防止 口腔疾病和牙病 的发 葡萄糖氧化酶活力的测定：参考文献1-7]方法，在 生 ]，有文献报道，葡萄糖氧化酶抑制法可 以用于检测 3mL的反应体系中，包含 0．1mol／L磷酸缓冲液 (pH 食品中镉、锡、铅的残留量[s]．在生物方面，可制成传感 7．O)，16mmol／L苯酚及 4mmol／LTritonX-100，7．5 器用于发酵过程 中葡萄糖浓度的在线检测，是生物传 mmol／L的4一氨基安替吡啉，0．55mol／L葡萄糖溶液 感器最主要的工具酶．本文报道 了金属离子对青霉葡 及 0．1mg／mL辣根过氧化物酶，震荡混匀，加入 0．I 萄糖氧化酶活性 的影响，为该酶 的应用开