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第二章 培养基及制备 第一节 工业发酵培养基 发酵培养基的作.
第二章 培养基及制备
第一节 工业发酵培养基
发酵培养基的作用:
满足菌体的生长
促进产物的形成;一、工业上常用的碳源(carbon source)
1.谷物淀粉(玉米、马铃薯、木薯淀粉)
— 应用最广。
使用条件:
微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类。;; 2. 葡萄糖
所有的微生物都能利用葡萄糖,但会引起葡萄糖效应。
工业上常用淀粉水解糖,但是糖液必须达到一定的质量指标。;;3.糖蜜
(制糖工业上的废糖蜜或结晶母液)
甘蔗糖蜜(cane molasses)
包括
甜菜糖蜜(beet molasses)
;糖蜜使用的注意点:;二、工业上常用的氮源(nitrogen source)
1.无机氮(迅速利用的氮源)
种类:氨水、铵盐或硝酸盐、尿素
选择合适的无机氮源有两层意义:
满足菌体生长
稳定和调节发酵过程中的pH
;无机氮源的影响:硫酸铵硝酸铵硝酸钠尿素;2.有机氮:
来源:一些廉价的原料,如玉米浆、豆饼粉、花生饼粉、鱼粉、酵母浸出膏等。
成分复杂:除提供氮源外,还提供大量的无机盐及生长因子。;三、无机盐(inorganic mineral)
硫酸盐、磷酸盐、氯化物及一些微量元素。
四、生长因子(growth factor)
微生物生长不可缺少的微量有机物质。如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素。
;生物素
作用: (1)主要影响细胞膜通透性。
(2)影响菌体的代谢途径。
谷氨酸产生菌为生物素缺陷型。
要达到菌体生长需要的“亚适量”。;2.提供生长因子的农副产品原料
(1)玉米浆:(corn steep liquor, CSL)
最具代表性。
(2)麸皮水解液
(3)糖蜜
(4)酵母; 第二节 淀粉水解糖的制备
在工业生产中,将淀粉水解为葡萄糖(glucose)的过程称淀粉的糖化,制得的溶液叫淀粉水解糖。; 一、淀粉水解制糖的意义
大多数微生物不能直接利用淀粉(所有的氨基酸生产菌不能直接利用)
2.有些微生物能够直接利用淀粉作原料,但必须在微生物产生淀粉酶后才能进行,过程缓慢,发酵周期延长。
3.若直接利用淀粉作原料,灭菌过程的高温会导致淀粉结块,发酵液粘度剧增。;二、淀粉水解糖的制备方法及原理
(一)酸解法(acid hydrolysis method)
以酸为催化剂,在高温高压下使淀粉水解生成葡萄糖的方法。
;1.水解过程:
总反应式: (C6H10O5)n+nH2O nC6H12O6
过程:(C6H10O5)n (C6H10O5)x C12H22O11 C6H12O6
淀粉 糊精 麦芽糖 葡萄糖
H+对作用点无选择性,?-1,4-糖苷键和?-1,6-糖苷键均被切断。;2.葡萄糖的复合反应和分解反应
在水解过程中,由于受到酸和热的作用,一部分葡萄糖会发生复合反应和分解反应。; 淀粉
葡萄糖
复合二糖 5‘-羟甲基糠醛
复合低聚糖 有机酸、有色物质
损失葡萄糖量 7% 1%; 不利影响:
(1)降低了葡萄糖的收率。
(2)给产物的提取和糖化液的精制带来困难。
复合反应:生成的多数复合糖不能被微生物利用,使发酵结束时残糖高。
分解反应:生成的5‘-羟甲基糠醛是产生色素的根源,增加了糖化液精制脱色的困难。;如何控制分解反应和复合反应的发生?
(1)淀粉乳浓度
(2)酸浓度 不能过高
(3)温度; 3.评价
优点:工艺简单,水解时间短,生产效率高,设备周转快。
缺点:
(1)副产物多,影响糖液纯度,一般DE值只有90%左右。
(2)对淀粉原料要求严格,不能用粗淀粉,只能用纯度较高的精制淀粉。;DE值:dextrose equivalent value
(葡萄糖当量值)
表示淀粉糖的含糖量。
还原糖含量(%)
DE值= ? 100%
干物质含量(%);(二)酶解法(enzyme hydrolysis method)
用专一性很强的淀粉酶及糖化酶将淀粉水解为葡萄糖的工艺。
;分两步:
(1)液化:用?-淀粉酶将淀粉转化为糊精和低聚糖(2)糖化:用糖化酶(又
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