√环境工程微生物学(十三 微生物学新技术在环境领域的应用-1).ppt

制备固定化酶或固定化细胞时，需要在严密和尽量温和的条件下进行，已研究许多有效的方法可以制备表现活力高，使用寿命长的“长效、无公害”的生物催化剂。因为应用这些催化剂不仅使用寿命长，而且整个工艺过程几乎无三废污染。 在固定化酶广泛应用的基础上，人们发现天然细胞本身就具有多功能的系列化反应系统，因此采用物理或化学方法将细胞固定化，这是利用酶或酶系的一条捷径。 固定化细胞技术开始于70年代，其实际应用程度已超过固定化酶。 固定化细胞比固定化酶具有明显的优点，主要是省去了破碎细胞提取酶的手续。酶在细胞内环境中稳定性较高，进行完整细胞固定化时，酶活力丢失较少。尤其在需要利用复合酶系时，应用固定化细胞生物反应器可以把发酵工艺改为连续酶法反应，其制造成本也较低。 2、固定化微生物（固定化细胞） 以与固定化酶相同的固定方法将酶活力强的微生物体固定在载体上，即成固定化微生物。 微生物体本身是多酶体系的固定化载体，将整个细胞固定化更有利于保持其原有活性，甚至可提高活性。 包括死细胞固定化、生长细胞固定化。 固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞。该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢，又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。 通过化学或物理的手段将游离细胞或酶定位于限定的空间区域内,使其保持活性并可反复利用。 固定化细胞的依据 1）从广义上讲，微生物细胞所具酶系统相当于被一层层具有选择透性的胞膜或质膜所包埋，这些酶本身已经是固定化酶。 2）既然固定化细胞本身已经是一种固定化酶，如果设法除去细胞所特有的对细胞起自溶作用的酶系统，并防止外来细胞对它的侵袭，就能使此细胞反复利用。 3）细胞膜（包括原生质膜、线粒体膜、核膜等）具有选择透性，往往阻止人们因生产某种产品所加特定底物的进入（不象尼龙），这是细胞固定化过程中需考虑的。 4）微生物细胞具有维持其生命活动的完整的酶系统，各酶又严格地处于各亚细胞器上，酶促反应有着严格的顺序性，在制备固定化菌体细胞的过程中应尽可能完整地保持细胞的这种特定状态。 良好固定化细胞方法的条件： 1）应该能够控制固定化细胞的大小和空隙度； 2）原料易得、成本较低，方法简便、易行，载体对细胞是惰性的，固定过程温和，对细胞损伤轻； 3）固定化细胞应具有稳定的网状结构，在所使用的pH值和温度下，不会被破坏； 4）在反应器内长时间运转过程中，固定化细胞具有良好的机械稳定性和化学稳定性； 5）固定化细胞应使底物、产物和其他代谢物能够自由扩散，因为产物和其他代谢产物常能抑制细胞的酶反应； 6）单位体积的固定化细胞应拥有尽可能多的细胞。 有细胞特性，生物催化剂功能，固相催化剂特点。 优点： ①无须进行酶的分离纯化 ②保持酶的原始状态，酶回收率高 ③比固定化酶稳定性高 ④细胞内酶附助因子可再生 ⑤细胞本身含多酶体系 ⑥抗污染能力强 固定化细胞的特点 3、固定化酶和固定化微生物的特性 稳定、降解有机物性能力强，耐毒，抗杂菌，耐冲击负荷。 制成酶布和酶柱后用于连续流运行，酶不会流失。 固定化微生物技术的主要特征 密集微生物，维持反应器中的生物量浓度 易于实现固液分离 适用于含有有毒有害物的处理 传统工艺 微生物以悬浮态生长 易于从反应器中流失 传统工艺 与水的密度差小 重复利用较困难 固定化微生物 微生物固着生长，有利于提高微生物的数量，利于固液分离，利于去除氮、高浓度有机物或难以生物降解物质，提高系统的处理能力和适应性 六、固定化酶和固定化细胞在环境工程中的应用及前景 雏形 活性污泥法可以看成是包埋固定化生物技术的雏形 20世纪五六十年代 生物膜法，依靠微生物的自然附着力形成固着型生物膜 20世纪七十年代末 人工强化的固定化微生物 固定化微生物技术的发展 固定化酶技术只限于水解酶类和少数胞内酶研制成功和应用，多酶体系的固定化技术尚未解决；废水的组分复杂、经常变化，要用多种单一的固定化酶才能完成某一物质的多步骤反应，才能使有机物完全无机化和稳定化。 固定化酶制成酶膜、酶布、酶管（柱）、酶粒、酶片。如废水中的氰化物在氰水解酶、甲酰胺酶、甲酸脱氢酶的作用下，分解为二氧化碳、氢气、氨。 （一）在废水生物处理中的研究现状 处理三废 应用固定化酶或固定化细胞可以组成快速、高效、连续运行的污水处理系统。如用固定化分解氰化物的细菌除去废水中的氰化物；用固定化α-淀粉酶处理造纸厂的废水；用水解农药的细菌固定化制剂处理农药废水等。 难降解有机废水的处理 含酚废水的处理 含芳香族类化合物废水的处理 其他难降解废水的处理 高浓度有机废水的处理 通过筛选分离出高效菌株或是通过生物工程技术培养特异菌株并进行扩大培养及固定 提高反应速率和处理效率 减少污泥量和二沉池的负荷 降低基建投资费