大扁杏组织培养的研讨.pdf

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摘 要 大扁杏 (PrunusarmeniacaLinn.)是近年来在我国北方推广栽植的以龙王帽、优 一、白玉扁、一窝蜂等优良品系为主的甜仁杳品种。目前主要通过嫁接方法繁殖。国内 外仅有少量有关大扁杳组织培养研究的报道。本文通过对大扁杏组培过程中影响无菌材 料建立、茎段增殖培养及愈伤组织诱导关键因素的研究,旨在为建立适合大扁杏离体快 繁、基因保存、遗传转化技术体系奠定基础。具体结果如下: 1.外植体的最佳采取时间以5月为宜,表面消毒采用0.1%HgCIZ两次3min的间 歇性消毒方法较好。 2.茎段起始培养选用高盐培养基MS好于中盐和低盐培养基,其上增殖芽数较多, 茎芽高生长明显。 3.增殖培养时添加低浓度 6-BA(0.2--1.Omg/1)对芽的增殖生长有利,6-BA为 0.8-1.Omg/L时,茎芽数可达5.9个。添加低浓度的KT(0.10.8mg/L)对茎芽增殖 没有影响,超过1.2mg/L时诱导出大量的愈伤组织。 4.改良的MS培养基中,N,K,Cl的含量分别为840,391,105mg/L时,大扁 杏茎芽增殖数最大,茎芽伸长生长最高 5.在MS培养基和改良MS培养基中同时添加不同浓度的6-BA和IBA,对茎芽增 殖和伸长生长的影响效果不同。当6-BA和IBA浓度分别为1.Omg/L,0.08mg/L时, 茎芽增殖和伸长生长均达到最大,但改良MS培养基明显好于MS培养基。 6.改良MS培养基中N03NH4+比值为1.4时,芽增殖、伸长生长较好;当N03/NIA` 比值为0.7时,茎芽数增加而伸长生长被抑制;当NO/NH4+为2.8时,茎芽数减少而伸 长生长有所增加,茎芽生长势弱。 7.在改良MS培养基中添加1.0-2.0mg/I的GA。对茎的伸长有明显的促进作用, 当超过2.0mg/I时,茎芽生长弱,不利于继代培养。 8.叶片愈伤组织诱导最佳的叶龄是完全展开的幼叶,愈伤组织的诱导率最高可达 87%,质密色绿;叶片中轴近叶柄的部位诱导率最高;在MS培养基上添加1.0-1.5mg/L 的2,4-D或1.5-2.0mg/LKT,愈伤组织诱导率高,生长好。 关键词:大扁杏;组织培养;茎段;愈伤组织;离体培养 Keywords:PrunusarmeniacaLinn.;tissueculture;stemsegment;callustissue;invitro Abstract PrunusarmeniacaisthemainsweetPrunusthatspreadinnorthChinaonrecentyears includingPrunusarmeniacaandsoon.Nowitmainlyusegraftingtopropagation.Therearea littlereportsabouttissuecultureofPrunusarmeniacainandouthome.Thestudycarried onthekeyfactorofestablishingthePrunusarmeniacanofungussystem,usingPrunus armeniacastemspropagateitsbudsandinduceitscallustissue,toestablishthefoundationfor 尸runesarmeniacarapidpropagation,genekeepingandgenetictechniquesystem.Thedetail resultsareasfollows: I.Mayistheoptimumtimetopickexplant.UsingHgC120.1%tosterilizeexplantstwo times,eachtimefor3min. 2.MSmediumisbetterthanothersforthebeginningcultureofPrunusarmeniacastems. Itimprovedbudsinduceandgrowth. 3.dded6-BA(0.2-LOmg/1)topropagationmediumsisbenefitforbudsgrowth.When added0.8一I.Omg/L6-BA,budsinductiveratesis5.9.Lowconcentra

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