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微生物工程考点整理 名词解释：名词解释5道，每道4分，每道里面又细分出两个相对应的名词。 1、微生物工程：旧称发酵工程或微生物发酵工程，利用微生物的特定性状和功能，通过现代工程技术生产有用物质或把微生物直接应用于工业化生产的一种生物技术体系。 2、富集培养（增殖培养） ：是在目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，从而有效地分离到所需要的菌株。这种方法又称为施加选择性压力分离法。 3、微生物原生质体融合：将双亲株的微生物细胞分别通过酶脱壁，使之形成原生质体，然后在高渗的溶液中混合，并加入物理的（如电融合）、化学的（如聚乙二醇）或生物的（如仙台病毒）助融条件，使双亲菌株的原生质体发生凝聚，这样通过细胞质的融合，细胞核的融合，尔后基因间的交换、重组，进而可在适宜的条件下再生出细胞壁，获得重组子的过程。 4、菌种活化:就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。 5、种子扩大培养：是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。 6、孢子培养基：供菌种繁殖孢子，常采用固体培养基。对这类培养基的要求是能使菌体生长迅速，产生数量多且优质的孢子，并且不会引起菌种变异。 7、种子培养基：供孢子发芽、生长和菌体繁殖。对于最后一级种子培养基的成分应该较接近发酵培养基，以便种子接入发酵培养基后，能迅速适应发酵环境，快速生长。 8、发酵培养基：发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。-淀粉酶的菌种：黑曲霉、米曲霉、米根霉、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。 5.谷氨酸发酵的菌种：棒杆菌属（如谷氨酸棒杆菌），短杆菌属（如黄色短杆菌、乳糖发酵短杆菌）、节杆菌属或小杆菌属的棒型细菌，产生其他氨基酸的生产菌有大肠杆菌，枯草杆菌。 6.微生物适宜生活的土壤深度是5-25CM。采土样季节最为理想的是秋季。采样时给塑料袋编号并记录地点、土壤质地、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离，以免微生物死亡。选择菌种遵循的原则：材料的来源越广泛，越有可能获得新的菌种。 7.富集菌种的方法有物理法：加热和膜过滤法；培养法：液体，固体培养。 8.培养基按纯度分为合成培养基和天然培养基，按状态分为固体培养基，半固体培养基和液体培养基。按用途分为孢子培养基，种子培养基和发酵培养基。培养基一般的营养成分：碳源，氮源（有机氮和无机氮），生长因子，（嘧啶，嘌呤，维生素等），产物促进剂和水。 9.纯种分离的方法有平板划线分离法、稀释涂布法、混菌法等。 10.常用的菌种保藏方法：斜面保藏法、穿刺保藏法、液体石蜡法、沙土管干燥保藏法、真空冷冻干燥保藏法、液氮保藏法、悬液保藏法、低温保藏法等。 11.比较大的菌种保藏机构有美国典型菌种保藏中心（ATCC）、日本大阪发酵研究所（IFO），中国微生物菌种保藏管理委员会（CCCCM）等。 12.育种方法：自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合、基因工程、单倍体育种、多倍体育种。微生物育种主要涉及前五种。 13.诱变时要尽量选择单倍体细胞、单核或核少的多细胞体来作出发诱变细胞，这是由于变异性状大部分是隐性的，特别是高产基因。根据细胞生理状态或诱变剂的性质和诱变谱来选择诱变剂，因为同一诱变剂的重复处理会使细胞产生抗性，有几大类诱变剂。物理诱变剂 ：紫外线、快中子、X射线、β射线、γ射线、激光。化学诱变剂：烷化剂（如强致癌的亚硝基胍），碱基类似物，移码诱变剂（如丫啶类化合物），脱氨基诱变剂（如亚硝酸）。生物诱变剂 ：噬菌体，转座子。 14.原生质体融合的一般程序：原生质体的制备→原生质体的融合和再生→原生质体的检出（筛选）。对微生物进行细胞融合时，革兰氏阳性菌和放线菌用溶菌酶去除细胞壁，革兰氏阴性菌用乙二胺四乙酸（EDTA）+溶菌酶去除细胞壁，真菌多用纤维素酶、几丁质酶和糖苷酶等溶壁；酵母菌用蜗牛酶溶壁。 15.代谢可分为分解代谢和合成代谢。分解代谢是指细胞将大分子物质降解成小分子物质，并在这个过程中产生能量。合成代谢是指细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子的过程，在这个过程中要消耗能量，合成代谢所利用的小分子物质来源于分解代谢过程中产生的中间产物或环境中的小分子营养物质。 微生物自我调节的部位：细胞膜、酶量和酶活性、限制基质的有形接近。酶促调节分两类：酶活性调节和酶合成的调节。其中，酶活性调节包括两个方面，即酶的激活作用和酶的抑制作用；按方式机制有 变构调节 和 修饰调节 。 而酶量调节的方式包括 诱导 和 阻遏 两